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100
- 供应商:
上海一基实业有限公司
- 规格:
10mg
规格:10mg;100mg;1g;包装规格可根据客户要求定制
一、产品简介
重组胰蛋白酶:CAS:9002-07-7;EC:3.4.21.4
重组胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可特异切割赖氨酸及精氨酸 C 末端肽键。本 产品为重组猪胰蛋白酶,氨基酸序列与猪胰来源的胰蛋白酶完全一致,重组基因工程生产,毕赤酵母表达。
二、 产品特性
来源:毕赤酵母
性状:溶液为无色至淡黄色澄清液体;冻干粉为白色或类白色结晶性粉末。
纯度(RP-HPLC): β-trypsin≥70%,α-trypsin ≤20%
比活:≥3800 U/mg pro
宿主蛋白残留量 :≤0.01%
外源性 DNA 残留量 : ≤ 10 ng/mg
特异性:切割精氨酸和赖氨酸羧基端肽键
三、产品用途
重组胰岛素及类似物生产;GLP-1 及类似物的生产; 各种细胞培养,如疫苗生产,干细胞的分离等; 重组蛋白、多肽的生产; 蛋白类、抗体类药物的质量检测; 蛋白质结构与功能研究,如蛋白质质谱、测序、肽图谱分析; 某些特殊化合物的酶促合成; 其他小分子蛋白或多肽的生产,如美容肽,抗菌肽、食品风味肽的生产等。
四、使用方法
需对消化不同细胞的消化时间、含量、温度进行研究。现以 5ml 含量 0.25%的消化液对消化 vero 和 bhk-21 两种贴壁细胞为例,将消化液预热至室温 25~30℃, 加入经培养的致密的单层细胞消化 7.5~10min 匀可被消化为小细胞团和单个细胞,对照组、含 EDTA 组、不含 EDTA 组细胞存活率≧93.47%。消化后的细胞以1:3 的比例传入新的培养瓶中,分别于 12h、24h 后观察细胞状态正常。
注意事项:活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF 等影响,金属离子螯合剂如 EDTA 等会抑制酶活;高浓度的无机盐对酶活性会有一定的影响。
五、存储稳定性
在–15℃条件下冻干粉可稳定保存 2 年,消化液 1 年。
六、产品优势
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:不含其他蛋白酶,无非特异性切割。
产量高:吨级罐生产,批产量可达 200g,适合工业客户生产。
支持定制:规格可根据客户需求定制。
七、注意事项和免责声明
本品具有吸潮性,应室温平衡后再取用。
本品不得用于临床诊断和治疗。
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文献和实验3) 电泳分析重组质粒 1%琼脂糖,0.5xTBE, 80V恒压电泳 未酶切质粒(用未重组的质粒作为Marker) 3μl质粒 + 0.5 μl 10 x loading 0.5 μl SYBR 酶切质粒(用标准DNA分子作为Marker) 8 μl质粒 + 1 μl 10 x
过程中使微萃取柱中金属离子树脂充分重悬,打出液体,如此反复吸打数次,最后排空弃掉结合缓冲液;(5) 目的蛋白洗脱 :一次或分多次吸入含磷酸钠,NaCl,咪唑的洗脱缓冲液,吸液过程中使微萃取柱中金属离子树脂充分悬浮,然后打出液体,如此反复吸打数次,最后将液体排出到干净的样品管中,即为纯化得到的蛋白溶液;(6) 脱盐:步骤 (5) 纯化过的蛋白溶液可通过 MicroSep® Size X tips 产品进行高通量自动化脱盐。图 4 MicroSep® Ni tips 纯化流程推荐方案 1:利用
我们知道,PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉,这使得运输非常便捷,只要常温即可。而且,细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定,在-20℃或-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解,然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键,因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活,这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。 那么,应该如何进行正确的溶解呢? 下面我们以Recombinant Human IL-4 (重组人IL-4,产品编号:200-04)的说明书为例
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