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- 2025年11月14日
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文献和实验保存 E．5×样品缓冲液,10ml 0.6ml 1mol/L的Tris-HCl（Ph6.8）、5ml 50%的甘油、2ml 10%的SDS、0.5ml 2-巯基乙醇、1ml 1%溴酚蓝，0.9ml的蒸馏水，可在4℃保存数周，或在-20℃保存数月。 ③ 二抗稀释液 AP-Anti mouse IgG(Whole molecule),SIGMA,CAT#A-3562; AP-Anti mouse IgGAM,ZYMED,CAT#62-6422 一般采取1:3000
蒸馏水到960ml，调PH到4.6，最后加蒸馏水到总体积1000ml （2）AEC（20X） AEC 15mg/ml，溶在DMF（二甲基甲酰胺，分子式HCOH(CH3)2 分子量73.10中） （3）0.6% H2O2（20X） 临用时，（1）（2）（3）各50ul，在1ml双蒸馏水中混匀30分钟内有效。 7、DAB（即DAB-4HCL） （1）1.5克DAB在100ml水溶液中（20X） （2）1M Tris（20X），用HCL调PH到7.4
ECD和戊二醛加入混合液，振摇后计时，用pH计检测，约2~3min时，pH降至6.6，再以1N的NaOH在4min内调pH至7.0，此时，将该混合固定液加入盛有细胞（经PBS漂洗过）的器皿中，在23℃固定7min后，以PBS洗去固定液，即可进一步处理。ECD即乙基-二甲基氨基丙基碳亚胺盐酸盐[1-ethyl-3（3-dimethyl-aminoprpyl）-carboi-imide hydrochloride]，简称乙基-CDI，常用于多肽类激素的固定，对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD单独应用
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