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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
2-Chlorotrityl chloride
- 库存:
100
- 供应商:
上海一基实业有限公司
- CAS号:
42074-68-0
【产品名称/CAS号】:2-氯三苯基氯甲烷42074-68-0
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文献和实验,在提取时需要多次抽提。 如果1-5,7 没有杂带,68有说明是氯仿过多引入杂带(有段时间为了怕酚残留,我的氯仿加入量为0.35体积) 另外从1-4中可以看出是不是由于Trizol不足量导致的杂带残余。 试验结果分析: 1 随着TRIzol的增加,RNA提取出来的质量会更好一些,但是都无法消除最上面的杂带,说明是蛋白残余的可能性比较小。 2 从7号管和常规提取法的5管,以及虽然同样抽提两次,但是加入氯仿过量的6管来看,抽提两次可以有效去除杂带 3 从5,6,8号管来看,氯仿过量会带入
而破坏 mRNA 活性。 2.但DEPC能与胺和巯基反应因而含 Tris 和 DTT 的试剂不能用 DEPC 处理。 四、实验步骤 1. 取 50~100mg 的组织加入1 ml Trizol 试剂,用匀浆器打匀( Trizol 先放于冰上)。 2. 将匀浆室温放置 5 min。 3. 加入 200 μl 氯仿剧烈震荡混匀 30s,冰上静置 3 min。 4. 12000 rpm,4℃ 离心 15 min。 5. 将上清液小心转移到新的 1.5 ml离心管中(取 400
化镁浓度, (2)泳道中出现模糊条带,如果DNA模板中存在RNA,按上诉提示浓度补加氯化镁,因为在PCR反应中可能缺少游离的镁离子. (3)在融化试剂时,将第三缓冲液在15-25度温育后混匀,若还有晶体状物质,放置过夜混匀后可再次使用. (4)检查退火温度和变性条件,如果需要可降低退火温度. (5)检查模板和引物的用量.增加循环次数和/或模板DNA的用量. 3. 泳道中出现模糊条带 (1)减少循环次数或模板DNA的用量, (2)提高退火温度,单不要超过68度, (3)重新
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