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- 2025年07月12日
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文献和实验在园子里经常看到询问冻存、复苏细胞的方法和注意事项。故介绍一些致命的 “败笔”，和解决方法。 希望对大家有帮助。 （ 以 Raji 为例） 一、细胞冻存： 1. 错误的时机： 细胞状态不好（长的太过了，培养液已经很黄；细胞可疑污染；细胞已 经开始凋亡或崩解；连续培养超过二个月，细胞性状已有改变改变）。 解决： 最佳时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后两周内。 2. 细胞太少： 冻存时细胞浓度低于 1-5×1000,000/ml。（复苏很难成功）。 解决： 离心后调整细胞
室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。生化实验一般建议用肝素抗凝。 ②样本保存：全血样本收集好后，若不能当天检测，4℃可保存1-2天。血清、血浆收集好后，若暂时不测定，可分装冻存备用，避免反复冻融，一般4℃可保存一周，-20℃可保存半个月，-80℃可保存一个月。特殊指标对样本有较高要求除外。 二、组织样本的收集和处理 1. 10%动物组织匀浆 取0.02-0.2 g新鲜动物组织块，用2-8°C的PBS（0.01 M，pH 7.4）漂洗，去除血液，滤纸拭干，称重，放入匀浆容器中，按照动物
Divide into two 15 ml c/f tubes--5 ml each. Invert for additional 5 min. Solution should be pink and will contain thread-like material. Spin at 4°C, 4000 rpm for 20 min to remove insoluble material. All spins done in fixed angle rotor
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