CpG 甲基转移酶(M.SssI)

CpG 甲基转移酶(M.SssI)

规格：500U|500U|100U|50U
英文名：CpG methyl transferase (M.SssI)
特性:
阻止限制性内切酶的切割
CpG 甲基化依赖性基因表达的研究
研究探针序列特异性与 DNA 大沟的相互作用
改变 DNA 的物理特性:
对 DNA 统一进行 [3H] 标记
减少限制性内切酶的酶切位点数目，提高限制性内切酶的特异性
概述:
CpG 甲基转移酶（M.SssI）能将双链二核苷酸识别序列 5´ ...CG...3´ 中所有胞嘧啶残基（C5）甲基化。
来源:
分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株克隆有桑皱褶螺原体（Spiroplasma sp.）MQ1 菌株的 CpG 甲基转移酶基因。
反应条件:
1X BalbBuffer 2 + SAM
[50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM，随酶提供），37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意:
MgCl2 并不是必需的辅因子。Mg2+ 存在时，M.SssI 更倾向于分散甲基化，而不是连续甲基化，同时，会出现具有拓扑异构酶的活性。
质保声明:
CpG 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 个酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BstUI 限制性内切酶切割所需要的酶量。
浓度:
4,000 units/ml 和 20,000 units/ml（通过 λDNA检测）。
注意事项:
CpG 甲基转移酶（M.SssI）可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式，因而可用于研究高等真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同，CpG 甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的 DNA 底物的甲基化效率相同，因此该酶是更为有效的 DNA 修饰工具。
只要限制性内切酶的识别位点含有 CG 序列或此二核苷酸的重叠序列，CpG 甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意:的是，CpG 甲基转移酶使 DNA 甲基化，而 E. coli 中的 Mcr 和 Mrr 的限制作用不受甲基化影响（详见 315-317 页），故应使用 Mcr-、Mrr- 的 E. coli 菌株（例如，C2925）作为转化的宿主菌。