pYr-adshuttle-3（穿梭载体）（双表达框结构，h

AAV 动物实验能做什么？肝 / 神经 / 眼 / 心血管 / 肌肉方向一文梳理

，而不是只盯一个滴度。 --- 各方向的血清型 + 启动子组合逻辑 血清型决定病毒进哪个组织，启动子决定基因在哪些细胞表达，两者要一起选。比如做肝脏，AAV8 进肝细胞效率高，再加肝细胞相关启动子能提高选择性；做神经元，PHP.eB 负责广泛中枢进入，hSyn 负责让基因只在神经元转录。下面这张方向表把最常见的组合列出来。 --- 一个容易被忽略的判断 不同器官之间最不该直接复制的是“血清型+剂量”组合。 肝、脑、眼、心脏、肌肉的组织结构和给药空间完全不同，因此同一个AAV产品也需要不同的方案设计。 核心

甲醇酵母表达载体及其元件

标记一般为对应于营养缺陷型受体的野生型基因，常用HIs4。由于P．Pasotris不利用蔗糖，所以也可用啤酒酵母的蔗糖酶基因suC2作为标记。AMP：氨苄抗性基因，可在大肠 杆菌中筛选。G418和Zeocinr(Invitrogen，sandiego，CA)也是筛选标记，使得到高拷贝的转 化子，这是因为表达载体上外源基因和卡那基因相偶联。Zeocinr在E.coli和P.Pastoris宿主中都表达，因此缩短了穿梭载体的长度，但Zeocin是一种强诱变剂，可能导致转化子产生突变。 3、信号

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

相同的反应，但是它们常常在不同的组织或生理条件下被差异表达。利用 PMF 区分蛋白质异构体有一定难度，因为能够区分不同异构体的特异性肽段可能无法从 10%~40% 的肽段覆盖中找到。由于许多要研究的物种尚缺乏完整基因组、mRNA 和（或）蛋白质序列，导致通过 PMF 区分异构体的工作更加复杂。 完整蛋白质分子质量的精确测定能为区分异构体提供额外的信息。实验证明，用 SDS-PAGE 鉴定完整蛋白质分子质量的精确度很低（约 10% 的误差），而且被测蛋白质和标准分子质量蛋白质之间的结构差异