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上海一基实业有限公司
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3748-13-8
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文献和实验用15000r/min离心30min. 5.轻吸上清液。沉淀用含PEG或BSA的缓冲液悬浮,恢复原体积后再离心。如此洗涤2~4次。以彻底除去未结合的蛋白质。 6.免疫金复合物最终用稀释液配制成工作浓度保存。稀释液通常是加入稳定剂的缓冲液。缓冲溶液常用中性的PBS或Tris缓冲液。 多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为良好的高分子稳定剂,医学教|育网|收集整理PEG和BSA是最常用的稳定剂。稳定剂有两大作用:一为保护胶体金的稳定性,使之便于长期保存;二为防止或减少免疫金复合
用25000r/min离心30min,40nm金颗粒用15000r/min离心30min。 5.轻吸上清液。沉淀用含PEG或BSA的缓冲液悬浮,恢复原体积后再离心。如此洗涤2~4次。以彻底除去未结合的蛋白质。 6.免疫金复合物最终用稀释液配制成工作浓度保存。稀释液通常是加入稳定剂的缓冲液。缓冲溶液常用中性的PBS或Tris缓冲液。 多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为良好的高分子稳定剂,||PEG和BSA是最常用的稳定剂。稳定剂有两大作用:一为保护胶体金的稳定性,使之便
5.0 (二)凝胶过滤法 为纯化免疫金探针的最好方法,其特点是简便,过滤的胶体金颗粒比较均匀,不容易凝集,而离心方法转速高,时间长,胶体金颗粒沉淀容易凝集,用凝胶过滤克服了这一弱点。选用本方法时胶体金溶液必须用牛血清白蛋白作稳定剂。具体操作过程如下: (1)将浓缩好的胶体金以1500r/min离心去掉大的聚合物。吸出上清待过柱。 (2)柱高34cm,直径1cm,加样体积为柱床体积的1/10。 (3)丙烯葡聚糖S-400(Sephacryls—400 , Pharmacia, Sweden)装柱
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