核酸内切酶VIII

核酸内切酶VIII

英文名：Endonuclease VIII
规格：1000U
产品简介:
大肠杆菌核酸内切酶 Ⅷ 既有 N -糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶 (AP) 位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的 3"和5" 端切割磷酸二酯键,产生 5" 磷酸和 3" 磷酸末端。能被核酸内切酶 Ⅷ 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 Ⅷ 与核酸内切酶 III 的活性相似,但核酸内切酶 Ⅷ 具有 β和δ 裂解酶活性,而核酸内切酶 III 只有 β 裂解酶活性。
具体有下列特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数,1∶104〜1∶105
2.碱洗脱
3.碱解旋
反应条件:
1X Endonuclease VIII 反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl,75 mM NaCl,1 mM EDTA(pH 8.0 @25℃)],37℃ 温育。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中,37℃ 条件下,1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点*的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。 AP 位点的创建方法如下:37℃条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA糖基化酶 (UDG)处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,250 mM NaCl,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 8.0@ 25℃
热失活:
75℃ 10分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。