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文献和实验假阳性反应。 3.色素形成法 在酶作用下使无色化学物质在局部形成色素沉着。以下主要介绍三种类型: (1)四唑盐法(tetrazolium method):此法主要显示各种脱氢酶。在脱氢酶作用下,组织切片在含有四唑盐或双四唑盐的底物混合液中,使底物分离出的氢原子与五色四唑盐或双四唑盐结合形成红色或蓝色甲腊(formazane)或二甲腊(difomazane)色素。这种色素沉着于酶所在部位。四唑盐法原理 (2)靛酚蓝法(indophenol blue method):该法主要显示
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-20℃沉淀1小时,同上离心弃上清,(有必要再用80%丙酮(含10 mMβ-巯基乙醇所得沉淀低温冷冻真空抽干。按每mg干粉加入20μl(可调)UKS液[9.5 M尿素,5mM 碳酸钾,1.25%SDS,0.5%DTT(二硫苏糖醇),2% Ampholine (Amersham Pharmacia Biotech Inc,pH3.5-10),6% Triton X-100],37℃育30min,期间搅动几次,28度 (温度低,高浓度的尿素会让溶液结冰)16000 r/min离心15 min,离心力越
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