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- 2025年07月07日
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文献和实验假阳性反应。 3．色素形成法 在酶作用下使无色化学物质在局部形成色素沉着。以下主要介绍三种类型： (1)四唑盐法(tetrazolium method)：此法主要显示各种脱氢酶。在脱氢酶作用下，组织切片在含有四唑盐或双四唑盐的底物混合液中，使底物分离出的氢原子与五色四唑盐或双四唑盐结合形成红色或蓝色甲腊(formazane)或二甲腊(difomazane)色素。这种色素沉着于酶所在部位。四唑盐法原理 (2)靛酚蓝法(indophenol blue method)：该法主要显示
-20℃沉淀1小时，同上离心弃上清，（有必要再用80%丙酮（含10 mMβ-巯基乙醇所得沉淀低温冷冻真空抽干。按每mg干粉加入20μl（可调）UKS液[9.5 M尿素，5mM 碳酸钾，1.25%SDS，0.5%DTT（二硫苏糖醇），2% Ampholine （Amersham Pharmacia Biotech Inc，pH3.5-10），6% Triton X-100]，37℃育30min，期间搅动几次，28度 （温度低，高浓度的尿素会让溶液结冰）16000 r/min离心15 min，离心力越
要设立对照。该法可用于多样本、多位点甲基化的检测，样本需要量少，适于临床样本，但存在假阳性问题。 2.2.11 甲基化敏感性斑点分析（methylation sensitive dot blotassay，MS-DBA） G Clément等2005年[43]报道了一种新的方法，能够定量或半定量分析样本中的甲基化水平。这个方法的过程是：先用重亚硫酸盐处理待测DNA片段，随后以非CG区的引物行PCR扩增，将扩增产物变性后转移到尼龙膜上，用3'端DIG标记的含有2个CG（或TG）的双核苷酸探针与DNA
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