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- 2025年11月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Koi herpesvirus (KHV) nucleic acid detection kit (PCR- fluorescence probe)
- 库存：
10
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
次
【包装规格】24/50/96测试/盒
【类别】PCR-荧光试剂盒
【运输】低温、避光、快递免费送货上门。
【用途】生化实验，合成实验等试验。
锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)常见问题：
一.没有扩增产物
1.循环温度：变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度，缩短退火或延伸时间
锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的改进与完善：
Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段，其缺点是：
①Klenow酶不耐高温，90℃会变性失活，每次循环都要重新加，每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期，给PCR技术操作程序添了不少困难。
②引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间的碱基错配，其PCR产物特异性较差，合成的DNA片段不均一。
2）1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA片段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次，仍需加入新酶。
3）1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)此酶具有以下特点：
①耐高温，在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。
③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率，因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别，将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。
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文献和实验就是更快更准确的做完实验，完成课题，很多同类的试剂对我们来说没有意义。但是，从另一个角度来说，各个公司的产品终究有些性能的差别，选择最合适的试剂，能够让科研事半功倍。所以，如果真的被选为锦鲤，能够不受资（lao）金（ban）限制的自由选择试剂的话，还是很有希望尽快完成课题的。不过，这一切的前提，还是要对试剂有充分的了解。当锦鲤也不容易，要做足准备才行呢！△ 图源：站酷海洛就从 AB 君说的 Taq 说起吧。PCR 是分子生物学实验基础中的基础，是每个科研人员都要接触的实验。PCR 的核心组分
领域。例如，可以在PCR扩增中用同位素或荧光素等标记引物或核苷，也可以在电泳后用银染或溴化乙锭染色以显示结果。这里将重点介绍最常用的放射性同位素PCR-SSCP法。在进行PCR扩增特定靶基因序列时，利用γ-32P-ATP标记引物或直接在PCR反应体系中加入α-32P-dCTP进行PCR扩增，使扩增产物带有同位素标记物，然后将扩增产物变性为单链进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，放射自显影显示结果。利用引物标记或碱基掺入法使PCR扩增产物带有同位素标记物，均可使产物信号增强几个数量级。二者相比较，前者经济
这类病毒是以其代表性的即单纯疱疹病毒的名称为词首命名的。病毒体（ virion）呈球状，直径为 150— 250毫微米，包膜（ Envelope）中有直径 100毫微米左右的正二十面体状壳体。壳微体为 92个，核酸为双链 DNA，分子量 70— 100× 106 。在细胞核内增殖，富尔根（ Feulgen）反应阳性，形成嗜依红性的 Cow－ dryA型包涵体，根据这些特征，有人把它们称为核型包涵体 A（ NITA）病毒类。在细胞的核膜内侧出芽。无凝集红血球的能力。在天然寄主或实验
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