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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D7345
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输,-20℃保存
- 保质期：
一年
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
5mg
荧光素(FITC)标记亲和素
规格：5mg产品简介:
本产品为荧光基团标记的亲和素。激发波长/ 发射波490nm/520nm,无游离荧光素。应用范围:荧光激活细胞分选；组织化学染色。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗 达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε 氨基共价结合，标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 激发下产生黄绿色荧光，通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定 性、定位或定量
浓度为20mg/ml，缓冲液容量为总量的1/10，混匀，将三角烧瓶置冰槽中，电磁搅拌速度适当，即以不起泡沫为宜搅拌5—10min； 2. 荧光素的准备。根据欲标记的蛋白质总量，按每毫克蛋白加0.01mg荧光素的比例，用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末； 3. 结合（或称标记）。将称取的荧光色素缓慢加入到球蛋白溶液中，并不停地搅拌，避免将荧光素粘于三角烧瓶壁或搅拌玻璃棒上，在大约5—10min内加完。然后继续搅拌12—18h。因荧光素与球蛋白结合期间要求必须
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