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- 2025年11月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
PCR kit for detection of bovine tubercle bacillus virus (LSDV)
- 库存：
10
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
次
【包装规格】24/50/96测试/盒
【类别】PCR-荧光试剂盒
【运输】低温、避光、快递免费送货上门。
【用途】生化实验，合成实验等试验。
牛结节疹病毒(LSDV)核酸检测试剂盒(PCR法)常见问题：
一.没有扩增产物
1.循环温度：变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度，缩短退火或延伸时间
牛结节疹病毒(LSDV)核酸检测试剂盒(PCR法)的改进与完善：
Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段，其缺点是：
①Klenow酶不耐高温，90℃会变性失活，每次循环都要重新加，每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期，给PCR技术操作程序添了不少困难。
②引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间的碱基错配，其PCR产物特异性较差，合成的DNA片段不均一。
2）1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA片段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次，仍需加入新酶。
3）1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。牛结节疹病毒(LSDV)核酸检测试剂盒(PCR法)此酶具有以下特点：
①耐高温，在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。
③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率，因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别，将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。
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文献和实验这类病毒是以其代表性的即单纯疱疹病毒的名称为词首命名的。病毒体（ virion）呈球状，直径为 150— 250毫微米，包膜（ Envelope）中有直径 100毫微米左右的正二十面体状壳体。壳微体为 92个，核酸为双链 DNA，分子量 70— 100× 106 。在细胞核内增殖，富尔根（ Feulgen）反应阳性，形成嗜依红性的 Cow－ dryA型包涵体，根据这些特征，有人把它们称为核型包涵体 A（ NITA）病毒类。在细胞的核膜内侧出芽。无凝集红血球的能力。在天然寄主或实验
疱疹病毒 疱疹病毒（Herpesviruses）是一群中等大小的双股DNA病毒，有100个以上成员，根据其理化性质分为α、β、γ三个亚科。α疱疹病毒（如单纯疱疹病毒、水痘一带状疱疹病毒）增殖速度快，引起细胞病变。β疱疹病毒（如巨细胞病毒），生长周期长，感染细胞形成巨细胞。γ疱疹病毒（如EB病毒），感染的靶细胞是淋巴样细胞，可引起淋巴增生。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。引起人类产生的有7种疱疹病毒（见表29-1）。疱疹病毒主要侵犯外胚层来源
系统HSV感染有重要意义。 此外用DNA分子杂交法和PCR法检测HSV DNA，已显示较大优越性。现多用于实验研究，将在临床推广应用。 五、防治原则 （一）预防 由于HSV有致癌可能性，减毒活疫苗和死疫苗不宜用于人体。现研究中的各种疫苗如囊膜蛋白（提纯的gG、gD）亚单位疫苗，gB、gD基因重组痘苗病毒疫苗和多肽疫苗，在动物试验中显示良好效果，有应用前景。 孕妇产道HSV―2感染，分娩后可给新生儿注射丙种球蛋白作紧急预防。 （二）治疗 疱疹
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