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- KALANG
- 中国大陆
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- 2025年07月15日
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冷藏
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长期
- 英文名：
Human Methylated/Non-methylated DNA Standard
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大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
100次
人甲基化/非甲基化DNA标准品
规格：100次英文名：Human Methylated/Non-methylated DNA Standard
产品简介:
本产品可以用来检测亚硫酸盐修饰的样品DNA转换效率。包括2个对照DNA。
阴性对照甲基化比例不到1%,而阳性对照中的胞嘧啶99%都被甲基化形成CpG甲基化序列。每种DNA对照的浓度为10 ng/μL,可以直接用于PCR。
运输及保存:
常温运输,4℃保存、有效期一年。
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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
，在饱和的DNA结合染料存在的情况下进行PCR反应，在扩增后进行高分辨熔解曲线分析，HRM分析的特点为可以区分扩增产物中少至1个碱基变化的序列差异，从而通过尿嘧啶/胞嘧啶的差异判断扩增子来源于甲基化还是非甲基化的初始模板变异体。MS-HRM可评估引物之间整条扩增子的甲基化状态。由于它是一种闭管方法，可初步快速评估甲基化。相比于传统的方法，它的成本低廉，分辨率高，通量灵活（最多一次筛查384个样本，最少几个样本），并且准确率大大提升。结合标准品的特征熔解曲线，还可以对样本中存在的甲基化DNA比率进行基本
个外显子区[7]。健康人基因组中，CpG岛中的CpG位点通常是处于非甲基化状态，而在CpG岛外的CpG位点则通常是甲基化的。这种甲基化的形式在细胞分裂的过程中能够稳定的保留[8]。当肿瘤发生时，抑癌基因CpG岛以外的CpG序列非甲基化程度增加，而CpG岛中的CpG则呈高度甲基化状态，以致于染色体螺旋程度增加及抑癌基因表达的丢失[9]。 1.2 DNA甲基化的生物学作用 1.2.1 DNA甲基化与遗传印记、胚胎发育 DNA甲基化在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育过程中起着极其重要的作用。研究表明
酶HhaⅠ（GCGC）或HpaⅡ（CCGG）的识别位点,这样，经探针和目标序列杂交后，降低反应体系温度，并向其中加入连接酶HhaⅠ，若原样本DNA中含有HhaⅠ识别的非甲基化的位点，则非甲基化探针的两个寡核苷酸部分不能连接，而甲基化的探针顺利连接不被切割，在随后的PCR反应中只有两个寡核苷酸部分连接后的探针才能被扩增。最后分析扩增片段，确定待研究位点的甲基化情况（具体过程见图8）。 图8：甲基化特异性多连接依赖性探针扩增（MS-MLPA）示意图。用设计好的甲基化与非甲基化的探针（探针各寡核苷酸部分
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