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- 2025年11月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Chicken infectious anemia virus (CIAV) nucleic acid assay kit (PCR- fluorescent probe)
- 库存：
10
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
次
【包装规格】24/50/96测试/盒
【类别】PCR-荧光试剂盒
【运输】低温、避光、快递免费送货上门。
【用途】生化实验，合成实验等试验。
鸡传染性贫血病病毒(CIAV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)常见问题：
一.没有扩增产物
1.循环温度：变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度，缩短退火或延伸时间
鸡传染性贫血病病毒(CIAV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的改进与完善：
Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段，其缺点是：
①Klenow酶不耐高温，90℃会变性失活，每次循环都要重新加，每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期，给PCR技术操作程序添了不少困难。
②引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间的碱基错配，其PCR产物特异性较差，合成的DNA片段不均一。
2）1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA片段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次，仍需加入新酶。
3）1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。鸡传染性贫血病病毒(CIAV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)此酶具有以下特点：
①耐高温，在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。
③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率，因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别，将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。
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文献和实验的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种常规的试验技术。该法灵敏度高、操作简便、重复性好，是应用较多的IHHNV检测手段。（4）分子生物学检测方法目前，国内外已有多种分子生物学方法检测IHHNV，如聚合酶链式反应（PCR技术）能对感染初期或尚无明显临床症状的个体做出准确的检测。另外，基因探针法、RT-PCR法或核酸分子杂交、微阵列检测等方法，有较高的灵敏度，能准确地做出检测判断，但同时也存在操作步骤繁琐、耗时长、仪器昂贵等缺点，不适合现场快速批量检测。恒温PCR法检测水产病害恒温PCR
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