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- DC9530
- 2025年07月11日
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- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物
- 肿瘤类型：
见说明书
- 品系：
细胞系
- 组织来源：
平滑肌
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
见说明书
- 器官来源：
平滑肌
- 运输方式：
长温运输
- 年限：
永久
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
1*10（6）/ml
问题1：培养液pH 值变化太快
可能原因
（1）CO2 张力不对
（2）培养瓶盖拧得太紧
（3）NaHCO3 缓冲系统缓冲力不足
（4）培养液中盐浓度不正确
（5）细菌、酵母或真菌污染
建议解决方法
（1）按培养液中NaHCO3 浓度增加或减少培养箱内CO2 浓度，2.0g/L 到3.7g/L 浓度NaHCO3 对应CO2 浓度为5％ 到10％。
（2）松开瓶盖1/4 圈。
（3）改用不依赖CO2 培养液。加HEPES 缓冲液至10 到25mM 终浓度。
（4）hASMC(人气道平滑肌细胞)在CO2培养环境中改用基于Earle′s 盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hanks 盐配制的培养液。
（5）丢弃培养物，或用抗生素除菌。
问题2：培养液出现沉淀，但pH值不变
可能原因
（1）洗涤剂清洗后残留有磷酸盐，将培养基成分沉淀下来
（2）冰冻保存培养液
建议解决方法
（1）用去离子水反复冲洗玻璃器皿，然后灭菌。
（2）将培养液加热到37℃，摇动使其溶解如沉淀仍然存在，丢弃培养液。
问题3：培养液出现沉淀， 同时pH 发生变化
可能原因
细菌或真菌污染
建议解决方法
丢弃培养物，或用抗生素除菌。
问题4：培养细胞不贴壁
可能原因
（1）胰蛋白酶消化过度
（2）支原体污染
（3）培养瓶瓶底不干净
（4）培养液pH值过碱（NaHCO3分解）
（5）消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当
（6）细胞老化（如传代前细胞已汇合导致失去贴附性）
（7）接种细胞起始浓度太低或太高
建议解决方法
（1）hASMC(人气道平滑肌细胞)缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。
（2）分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。
（3）注意刷洗，或换用一次性塑料培养瓶
（4）使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2（将培养液敞口放入培养箱也可）
（5）重新配置消化液或培养液
（6）启用新的保种细胞
（7）调节最佳接种细胞浓度
问题5：悬浮细胞成簇
可能原因
（1）培养液中含钙、镁离子
（2）支原体污染
（3）蛋白酶过度消化使得细胞裂解释
（4）DNA污染
建议解决方法
（1）用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻轻吹吸细胞获得单细胞悬液。
（2）分离培养物，检测支原体。如发现支原体污染，丢弃培养物。
（3）用DNase I 处理细胞。
问题6：原代细胞培养物污染
可能原因
原代培养组织在进入培养前已污染
建议解决方法
培养前用含高浓度抗生素的平衡盐溶液反复冲洗组织。
问题7：培养细胞生长减慢
可能原因
（1）由于更换不同培养液或血清
（2）培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。
（3）培养物中有少量细菌或真菌污染
（4）试剂保存不当
（5）接种细胞起始浓度太低
（6）细胞已老化
（7）支原体污染
建议解决方法
（1）hASMC(人气道平滑肌细胞)比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。让细胞逐渐适应新培养液。
（2）换入新鲜配制培养液，或补加谷氨酰胺及生长因子。
（3）用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物。或用抗生素除菌。
（4）血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在2－8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2 周内用完。
（5）增加接种细胞起始浓度。
（6）换用新的保种细胞。
（7）分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。
问题8：培养细胞死亡
可能原因
（1）培养箱内无CO2
（2）培养箱内温度波动太大
（3）细胞冻存或复苏过程中损伤
（4）培养液渗透压不正确
（5）培养液种有毒代谢产物堆积
（6）更多原因参考问题4和问题7
建议解决方法
（1）检测培养箱内CO2
（2）检查培养箱内温度
（3）取新的保存细胞种
（4）检测培养液渗透压。注意：大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260–350 mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。
（5）换入新鲜培养液
（6）更多解决方法参考问题4和问题7.
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文献和实验动脉平滑肌细胞 (Arterial smooth muscle cells)
是由粗肌丝（肌球蛋白）和细肌丝（肌动蛋白）组成，它们的一端借细肌丝附着于肌膜 的内面，这些附着点呈螺旋形。肌丝单位大致与平滑肌长轴平行，但有一定的倾斜度。粗肌丝没M线，表面的横桥有半数沿着相反方向摆动，所以当肌纤维收缩时，不但细肌丝沿着粗肌丝的全长滑动，而且相邻细肌丝的滑动方向是相对的。因此平滑肌纤维收缩时，粗、细肌丝的重叠范围大，纤维呈螺旋形扭曲而变短和增粗。 平滑肌细胞的主要作用是使中空器官收缩，例如血管、气道、胃肠道以及泌尿生殖道等，或者改变它们的硬度和直径。平滑肌细胞
只有 1 个小时用于设计前菜和主菜。学霸们甚至还给比赛起了个相当有意思的名字：耶鲁版料理の鉄人（英文是 Iron Chef, 不过日本原版的写法确实是这样）。同时，冠军的产生也相当正式：仅由主厨级厨师和少量学校行政人员构成的 「专家团」 进行评审，并不考虑菜品现场人气，而只从烹饪本身出发。不过看看最后的冠军作品。图 5. 2018 年冠军作品：法国地中海风味鸡腿肉配白豌豆泥及甘蓝沙拉另一个有趣的例子是素以 「高冷」 著称的 NASA. 没错，由于肩负着国际空间站和其他航空器内宇航员保障的重任，NASA 有一大
固有性抗感染免疫的主要组成 1．皮肤黏膜和内部屏障 皮肤黏膜屏障是抵御病原体人侵的第一道防线。除物理屏障作用外，皮肤与黏膜的附属腺体可分泌多种杀菌和抑菌物质，如皮脂腺分泌的不饱和脂肪酸、胃酸㈠乎吸道消化道内溶菌酶、防御素等。消化道正常菌群发挥生物学屏障作用，大肠杆菌分泌大肠菌素(colicin)抑制病原性肠道杆菌定植肠道。口腔舌部定植的非致病性硝酸盐还原菌，可还原食物中的硝酸盐生成NO，有效杀灭食物病原菌。内部屏障包括血-脑屏障和血胎屏障。血脑屏障能阻挡血液中病原
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