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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D5469
- 2025年07月06日
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2～8℃
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长期
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大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
40ml
BCIP/NBT碱性磷酸酶显色
规格：40ml产品介绍:
BCIP(5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate)5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐＋NBT(四唑硝基蓝)是碱性磷酸酶(AP)最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
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文献和实验检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测，我们通常使用碱性磷酸酶（AP）耦联的抗体，采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中，我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测，NBT/BCIP用于显色法检测。同时，对于膜杂交中的化学发光信号的检测，建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 检测底物 即用型CDP
一般使用辣根过氧化物酶 HRP-ECL 发光法或碱性磷酸酶 AP-NBT/BICP 显色法。 1．HRP-ECL 发光法： 将 A、B 发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于 A、B 混合液滴上，熄灯至可见淡绿色荧光条带（5 min 左右）后滤纸贴角吸干，置于保鲜膜内固定于片盒中，迅速盖上胶片，关闭胶盒，根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中 1～2 min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影，清水冲净晾干，标定
一抗可以是同一种属，方便我们购买。此方法通常需要先染比较难以染上的抗原，再染相对容易一点的抗原。 另外序贯平行法，我建议将两种抗原单独分离出来做，一定要做稳定了，在进行组合。 2 ：显色剂的选择 这要根据你最后封片的方式来分类，中性树胶和水溶性两种，所以选择染色系统，两个抗原显色系统的染色剂在封片方式一定要统一。因为水性封片不能长久保存，所以最常用的是DAB和BCIP/NBT，复染选择核固红。 以下是显色剂的封片方式 中性树胶 水性 HRP DAB + — AEC — + AP
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