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文献和实验细胞 ATP 检测和活体肿瘤示踪，共用一套双荧光素酶体系吗？
Section.01 什么是双荧光素酶实验？ 双荧光素酶实验 (Dual-Luciferase Reporter Assay) 是一种广泛应用于分子生物学的经典实验技术，主要用于定量检测基因表达水平以及验证生物大分子之间的相互作用 (如 miRNA 与靶基因、转录因子与启动子)。 核心原理 该实验利用荧光素酶基因转染到细胞中，通过检测其产生的荧光素酶活性 (“生物发光”) 来量化目标基因的表达水平。实验中会同时使用两种荧光素酶：萤火虫荧光素酶
表达，以此来进行选择最后的融合位置。 表 1. 常用荧光蛋白特性 荧光素酶 荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中主要有萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase，FLuc）和海肾荧光素酶（Renilla luciferase，RLuc）。荧光素酶报告系统非常灵敏，可以高效地检测基因的表达和细胞的活动情况，是分析转录因子与启动子活性、miRNA 与靶基因相互作用以及活体成像等的有效方法。 萤火虫荧光素酶（FLuc）：FLuc 的底物是荧光素，催化
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
见的四类是 EGFP（增强型绿荧光蛋白）、mCherry（红荧光蛋白）、荧光素酶（Luciferase，分萤火虫和海肾两种），以及其它荧光蛋白（ZsGreen1、tdTomato 等）。选哪个，取决于你最后靠什么设备读信号。 荧光蛋白和荧光素酶的核心区别 荧光蛋白（EGFP、mCherry 等）靠外来激发光打出荧光，能直接在显微镜下看到蛋白在哪、长什么样，适合定位和活细胞成像，但激发光有光毒性、细胞本身也可能有自发荧光造成背景。 荧光素酶靠加底物催化发光（化学发光法），不需要激发光、所以没
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