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文献和实验；此外还有Renilla（海肾）荧光素酶，只有36KD大小的蛋白，底物是腔肠素，只需要氧气，不需要ATP，发蓝色光，一直是萤火虫荧光素酶的替代，并常与萤火虫荧光素酶组合成为双色检测，或者作为内对照。 那么，让我们来看看现在有哪些新荧光素酶了？ 1. Gaussia荧光素酶，这是一种分泌型的蓝色荧光素酶，蛋白分子量更小，只有22KD，含有天然的分泌型信号肽，可以引导荧光素酶分泌到细胞培养上清中，从而无需裂解细胞即可检测报告基因活性。所表达的荧光素酶85%以上都会分泌至胞外，不过由于这种分泌型荧光素酶产生的信号
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
见的四类是 EGFP（增强型绿荧光蛋白）、mCherry（红荧光蛋白）、荧光素酶（Luciferase，分萤火虫和海肾两种），以及其它荧光蛋白（ZsGreen1、tdTomato 等）。选哪个，取决于你最后靠什么设备读信号。 荧光蛋白和荧光素酶的核心区别 荧光蛋白（EGFP、mCherry 等）靠外来激发光打出荧光，能直接在显微镜下看到蛋白在哪、长什么样，适合定位和活细胞成像，但激发光有光毒性、细胞本身也可能有自发荧光造成背景。 荧光素酶靠加底物催化发光（化学发光法），不需要激发光、所以没
表达，以此来进行选择最后的融合位置。 表 1. 常用荧光蛋白特性 荧光素酶 荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中主要有萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase，FLuc）和海肾荧光素酶（Renilla luciferase，RLuc）。荧光素酶报告系统非常灵敏，可以高效地检测基因的表达和细胞的活动情况，是分析转录因子与启动子活性、miRNA 与靶基因相互作用以及活体成像等的有效方法。 萤火虫荧光素酶（FLuc）：FLuc 的底物是荧光素，催化
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