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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京普凯瑞生物科技有限公司
- 规格:
100 x 20 µl rxns(1ml)
SYBR FAST qPCR试剂盒 40分钟完成定量!

KAPA公司针对市场上不同型号的qPCR仪开发了相应的试剂,详细见下表。

1、应用范围
1 )基因表达分析;2 }生物芯片验证;3 )低拷贝基因检测;4 )基因敲除验证。
2、技术优点
1 )最高的反应效率使达到阈值的循环数最早出现,并且灵敏度极高;2)最高的荧光强度提高了信噪比;
3)宽动态范围和很好的线性; 4)反应快速,节约40-60%的反应时间;5)快速/标准反应程序结果无差异。

3、同类产品比较

4、快速/标准反应程序,结果无差异

5、定量反应
1)推荐反应体系

2)推荐反应参数
①Roche仪器反应程序:

②非Roche仪器反应程序:

6、问题及解决方法

7、产品信息
| 货号 | 产品 | 规格 | 说明书 |
| KK4600 | 通用型SYBR快速定量 | 1ml,100x20μl |
请联系普凯瑞 |
| KK4601 | 通用型SYBR快速定量 | 5ml,500x20μl | |
| KK4602 | 通用型SYBR快速定量 | 10ml,1000x20μl | |
| KK4603 | ABIPrismTMSYBR快速定量 | 1ml,100x20μl |
请联系普凯瑞 |
| KK4604 | ABIPrismTMSYBR快速定量 | 5ml,500x20μl | |
| KK4605 | ABIPrismTMSYBR快速定量 | 10m,1000x20μl | |
| KK4606 | Bio-RadiCycler™SYBR快速定量 | 1ml,100x20μl |
请联系普凯瑞 |
| KK4607 | Bio-RadiCycler™SYBR快速定量 | 5ml,500x20μl | |
| KK4608 | Bio-RadiCycler™SYBR快速定量 | 10ml,1000x20μl | |
| KK4609 | RocheLightCycler®480 SYBR快速定量 | 1ml,100x20μl |
请联系普凯瑞 |
| KK4610 | RocheLightCycler®480 SYBR快速定量 | 5ml,500x20μl | |
| KK4611 | RocheLightCycler®480 SYBR快速定量 | 10ml,1000x20μl | |
| KK4617 | SYBR®Fast(ABIPrism) | 50ml | 请联系普凯瑞 |
| KK4618 | SYBR®Fast通用型 | 50ml | 请联系普凯瑞 |
| KK4620 | KAPASYBRFASTROXLow(5ml=500x20μIrxns) | 500x20μlrxns) | 请联系普凯瑞 |
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文献和实验几个复孔,选择重复性好的 CT 值参与计算。 (2)CT<30,重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法:从以下几个方面进行问题的排查:①加样准确度;②移液器吸取液体的准确度;③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样,减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系,并且增加模板的稀释梯度,大体积加样。如:原液 cDNA 添加 1μl,可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍,添加 5μl,使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系,也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法,最好在PCR扩增程序结束
成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
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