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大量
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康朗生物
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10ml
封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)
规格:10ml产品介绍:
正常血清是目前广泛使用的免疫学试验中的封闭及保护试剂。使用正常血清封闭可预先饱和组织切片对蛋白物质的物理吸附位点,从而大大减少组织对检测抗体的非特异性吸附。本封闭液采用优质正常山羊血清为原料,加入稳定剂和蛋白保护剂,可有效的的封闭组织上能与抗体非特异结合的位点,从而减少IHC实验的非特异染色,显著的降低背景。
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文献和实验一、SP 法 1)脱蜡、水化;2)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;3)3% H2O2(80% 甲醇)滴加在 TMA 上,室温静置 10 分钟;4)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;5)抗原修复;6)PBS 洗 2~3 次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗 50μl,室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS 洗 3 次各 5 分钟;11)滴加 Ⅱ 抗 40~50 μl,室温
不完全,若存在,需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 (5)抗原修复不完全:对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合。 (6)细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应:可加入组织透化步骤,进行细胞膜或核膜的透化。 (7)试剂盒保存不当:请于 4℃ 进行保存,勿室温防止过长时间。 (8)封闭时间过长:若使用封闭液进行封闭,请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2:免疫组化染色弱怎么办? (1)抗体浓度过低,孵育时间过短:可提高抗体浓度,进行抗体4℃过夜孵育。 (2)组织
一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写
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