RealPAGE凝胶预混液

RealPAGE凝胶预混液

规格：10板胶|50板胶
* 制备一块1 mm8cm×8cm凝胶需要分离胶预混液约4.5 ml，浓缩胶预混液约1.5 ml。
10板胶每套溶液可以配制至少10板凝胶; 50板胶每套溶液可以配制至少50板凝胶;
● 产品简介：
该产品利用聚丙烯酰胺凝胶电泳原理，采用合理设计的预混合配方和配制流程，可在20-30分钟内配制得到高质量的聚丙烯酰胺凝胶，用于变性和非变性蛋白凝胶电泳。本产品提供四种常用分离胶浓度8%、10%、12%和15%，可以满足绝大多数蛋白电泳需求。
● 特点：1. 方便：分离胶和浓缩胶的制备只需用预混液加上APS和TEMED即可；
2. 快速：20-30分钟内即可制备好凝胶。
3. 安全：预混液，不用接触有毒粉末。
4. 稳定：独特pH中性预混液配方，凝胶4℃稳定贮存一年。
● 贮存： 4℃贮存。有效期一年。
● 使用说明：一 凝胶制备：以下程序以制备一块1 mm厚，大小8cm×8cm凝胶为例，实际操作按照使用胶板规格调整试剂用量。
1．参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
2. 根据下表参考选择合适的凝胶浓度
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
8% 30-90kD
10% 20-80kD
12% 12-60kD
15% 10-40kD
3．分离胶配制：参照下表，在凝胶模具中灌入分离胶溶液（凝胶液加至距前玻璃板顶端约1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可），然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-2 cm的水层，使凝胶表面保持平整；静置10-15分钟（25℃），待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，说明凝胶已聚合；去除覆盖在分离胶上的水层。
分离胶配制 浓缩胶配制
分离胶预混液 4.5 ml /
5%浓缩胶预混液 / 1.5 ml
TEMED 4.5 μl 1.5 μl
10% APS 45 μl 15 μl
4．浓缩胶配制：将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端；将梳子插入凝胶内，避免产生气泡；静置15-20分钟（25℃），等待浓缩胶聚合。
注：凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。
二 电泳：1. Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液配制：10×Tris-MOPS-SDS缓冲液（1L配制量）：取一袋10×Tris-MOPS-SDS缓冲液，将粉末全部溶解于1升超纯水中，不要调节pH值，即配成1升10×Tris-MOPS-SDS缓冲液。
注： = 1 \* GB3 ① 10×Tris-MOPS-SDS缓冲液溶液 4℃避光贮存，如溶液变黄，表明试剂失效，不能使用。
= 2 \* GB3 ② 本产品提供10×Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液，适用于变性蛋白电泳。如要进行非变性电泳，请自行配制不含SDS的Tris-MOPS电泳缓冲液（见缓冲液配方）
电泳前，按照下表配制1×Tris-MOPS-SDS缓冲液
1×Tris-MOPS-SDS缓冲液配制量
400 ml 1000 ml
10×Tris-MOPS-SDS缓冲液 40 ml 100 ml
超纯水 360 ml 900 ml
注：400 ml 1×Tris-MOPS-SDS缓冲液可以完成一次电泳。
2. 凝胶凝固好后，上样，电泳。
电泳条件
电泳缓冲液 稳压电泳 起始电流 结束电流 电泳时间
1×Tris-MOPS-SDS缓冲液 140 V 90-120 mA 30-45 mA 45-70分钟
注：本产品使用Tris-MOPS-SDS缓冲液或Tris-MES-SDS缓冲液，不适合用Tris-甘氨酸-SDS缓冲液电泳。
三 缓冲液配方：1 10x Tris-MOPS-SDS缓冲液 (1 L)
组分浓度：0.5 MTris,0.5 MMOPS, 1% SDS，10mMEDTA 2Na，50mMNaHSO3
Tris base 60.6 g
MOPS 104.6 g
SDS 10 g
EDTA Na 3 g
NaHSO3 5.2 g
用灭菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)
2 10x Tris-MOPS缓冲液 (1 L)
组分浓度：0.5 MTris,0.5 MMOPS，10mMEDTA 2Na
Tris base 60.6 g
MOPS 104.6 g
EDTA Na 3 g
用灭菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)
3 1x Tris-MOPS-SDS缓冲液 (1 L)
组分浓度：0.05 MTris,0.05 MMOPS, 0.1% SDS，1 mMEDTA 2Na，5 mMNaHSO3
Tris base 6 g
MOPS 10.5 g
SDS 1 g
EDTA Na 0.3 g
NaHSO3 0.52 g
用灭菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)
4 1x Tris-MOPS缓冲液 (1 L)
组分浓度：0.05 MTris,0.05 MMOPS，1 mMEDTA 2Na
Tris base 6 g
MOPS 10.5 g
EDTA Na 0.3 g
用灭菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)