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- 详细信息
- 文献和实验
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20
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
瓶
规格:100ml,200ml,500ml(本产品规格可根据客户需求)
单位:瓶
保存方式及年限:五年
运输方式:快递
血清就是给细胞提供营养的,例如你培养细胞时细胞培养基中也需要加血清一样。
如果你培养的细胞是不含血清培养基培养,在选用冻存液时也一定要用无血清细胞冻存液了,这个就需要购买了。
另外自己配冻存液,可以是血清:DMSO=9:1,也可以是培养基:血清:DMSO=8:1:1
产品使用注意事项(仅供参考):
1.血清解冻最好采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。
2.血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。
3.热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。
4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。
5.产品有效期,检定合格之日起有效期5年。
4%鸡红细胞是细胞培养中最重要的元素之一。在实验室操作中要注意及处理方法:
1. 血清保存: 建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2. 解冻血清的方法: 建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
3. 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
4. 为什么要热灭活血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
5. 4%鸡红细胞有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量!
6. 为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?
胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
7. 如何避免沉淀物的产生?
解冻4%鸡红细胞时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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文献和实验持玻片,在一端加水,使染料“漂”走。空气中自然干燥或滤纸印干。 6、油镜观察,可见中性粒细胞吞噬葡萄球菌。如染色正确,可见细胞核及被吞噬细菌染成紫色,而中性粒细胞的细胞浆则为淡红色。 【结果】观察100个中性粒细胞,分别记录吞噬细菌的中性粒细胞数和每个中性粒细胞吞入的细菌数。计算公式为: 二、巨噬细胞吞噬功能检测 巨噬细胞吞噬异物的现象又称为大吞噬现象。此试验通过检测巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,了解巨噬
二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重排。二、方法(1)取新鲜鸡血以0.85%生理盐水制成10%的悬液。(2)称取0.5克PEG(MW=4,000)放入试管内,在酒精灯上融化之,迅速加入0.5ml预热的Hanks液混匀制成50%的PEG溶液。放入37℃水浴中待用。(3)取上述10%的鸡红细胞悬液1ml放入离心管中,再加入5ml Hanks液混匀,然后以1,000rpm离心5分钟,小心弃去上清,用指弹法将细胞团块弹散。(4)取上述
(3)取上述10%的鸡红细胞悬液1ml放入离心管中,再加入5ml Hanks液混匀,然后以1,000rpm离心5分钟,小心弃去上清,用指弹法将细胞团块弹散。 (4)取上述50%PEG溶液0.5ml,在1分钟内滴加到鸡红细胞悬液,边加边轻轻摇动混匀。待PEG全部加入后静置1分钟左右。此全部过程都要求在37℃水浴内进行。 (5)缓慢滴加9ml Hanks液以终止PEG的作用,在37℃水浴内静置5分钟。 (6)离心弃上清后,取一滴融合后的细胞悬液滴片,加盖片镜检
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