- ¥800 - 2350
- DSMZ细胞
- 美国/德国/日本
- ACC--1294
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃冻存
- 保质期：
二年
- 英文名：
JAR
- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
1x10^6 cells
细胞英文(简称）:JAR
细胞来源: ATCC DSMZ JCM ECACC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:胎盘绒毛
细胞形态:贴壁
细胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测:细胞不含有:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:DMEM(高糖) +10% FBS；37℃，5% CO2
传代方法建议:1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:90%FBS+10%DMSO
传代细胞培养操作步骤
1、 37度水浴加热所有试剂。
2、 吸取培养培养皿内旧培养液，放置一个干净离心管内。（为稍后终止消化作准备。）
3、 用PBS清洗培养皿，弃去。
4、 向瓶内加入消化液（胰蛋白酶液）。以能覆盖培养瓶底为宜。（一般一个大皿1ml）
5、 2-5分钟后，轻轻震荡培养皿。使JAR人胎盘绒毛癌细胞从瓶壁脱离形成细胞悬液。显微镜下观察若细胞由贴壁变为悬浮就加入血清（即原培养液）终止消化。
6、 收集细胞悬液，880转/分、5分钟离心，弃去上清液。
7、 加培养液至1ml，混匀后取10ul计数细胞。
8、 根据实验要求取适量细胞留种或接种于新的培养皿或96孔板、24孔板中，再加入相应体积的培养液。（90mm大皿是9ml，中皿好像是4mm，6孔板和小皿是2ml，96孔板是100ul）。
9、 接种好的培养皿顺时针和逆时针各转三圈，使细胞排列均匀。
10、 放入暖箱中继续培养。
细胞计数步骤：
1、将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板上.
2、将细胞悬液吸出少许，用台盼兰溶液对被稀释后滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。(台盼兰用于标记死亡细胞。)
3、镜下观察，计算计数板八大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算：
细胞数/ml＝8大格细胞总数/ 8×2×10000
细胞冻存与复苏：
JAR人胎盘绒毛癌细胞冻存和复苏的原则：慢冻快融
当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。
如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶很大，大结晶会造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。
1．冻存细胞
（1）选对数增生期细胞，在冻存前1d换液。
（2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×106／m1左右密度，离心，去上清。
（3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞成再悬液。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，它是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞的损伤
（4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m1悬液。
（5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，作好标记。
（6）冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度,在30～40 min时间内,下降到液氮表面，再停30 min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。
标准程序：
当温度在-25℃以上时， 1～2℃/min
当温度达-25℃以下时， 5～10℃/min
当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中
简易程序：
将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1～2℃的速度，在40分钟内降至液氮表面，停30分钟后，直接投人液氮中。
操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。
2. 复苏细胞
（1）从罐中取出冻存管。
（2）迅速放入37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成。
（3）冻存管用70％酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10 m1培养液。
（4）JAR人胎盘绒毛癌细胞低速离心(880r／min) 5 min，去上清后再用培养液洗一次。
（5）用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分，密度应达到107／m1，在融后稀释20倍后，仍能保持5×105／m1数量。
| DSMZ细胞库 | ACC 627 | ULA | ACC 221 | BF-45 | ACC 310 | ECV-304 | ACC 303 | SK-MEL-1 | ACC 395 | KU-19-19 |
| DSMZ细胞库 | ACC 428 | D3 | ACC 226 | NUC-5 | ACC 536 | PL-21 | ACC 571 | SU-DHL-5 | ACC 346 | HD-MY-Z |
| DSMZ细胞库 | ACC 631 | HB-894 | ACC 443 | CAL-12T | ACC 662 | UPCI-SCC-114 | ACC 501 | MEL-745A cl. DS19 | ACC 170 | J-774A.1 |
| DSMZ细胞库 | ACC 276 | A-2 | ACC 102 | MV4-11 | ACC 8 | KM-H2 | ACC 4 | U-698-M | ACC 57 | HELA |
| DSMZ细胞库 | ACC 546 | SEM | ACC 545 | KARPAS-1106P | ACC 385 | EGI-1 | ACC 669 | UPCI-SCC-154 | ACC 651 | WILL-1 |
| DSMZ细胞库 | ACC 67 | EHEB | ACC 544 | H-2171 | ACC 601 | KYO-1 | ACC 121 | GIRARDI HEART C7 | ACC 489 | RH-30 |
| DSMZ细胞库 | ACC 462 | JAR | ACC 234 | A-427 | ACC 80 | EB-1 | ACC 579 | NU-DUL-1 | ACC 417 | HN |
| DSMZ细胞库 | ACC 305 | 293 | ACC 296 | A4-1025 | ACC 50 | OPM-2 | ACC 444 | FU-OV-1 | ACC 582 | OCI-AML3 |
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文献和实验最初，用0.25%胰酶消化液传代，细胞脱壁容易，但是，吹打细胞180次左右，也只有80％细胞是单个细胞，而且，易引起细胞机械性损伤。于是，我改进方法。 现在，我的处理如下： 弃旧培养液 0.02％EDTA作用2分钟 弃EDTA 0.1％胰酶作用30秒 弃胰酶，继续消化2分钟 加培养液终止消化。一般吹打细胞30－40次，细胞基本为单个。 EDTA是一种化学螯合剂，主要作用主任已说。我要提醒一下：EDTA作用不受血清抑制，故消化后需彻底清除，否则影响细胞生长。 建议：可能的话离心
7.淋巴瘤2株：LY-S, T2 8.乳腺癌1株：SK-Br-3 9.脑胶质母细胞瘤1株：BT325 10.胎盘绒毛膜上皮样癌1株：JAR 11.黑色素瘤1株：A375 12.人纤维肉瘤1株：HP 13.骨髓瘤细胞1株：SP2/0 14.病毒包装细胞2株：PA317, NIH3T3 15.其他：L929
人类组织肿瘤细胞 10104 人淋巴瘤细胞(B类)A-204 人横纹肌肉瘤A375 人皮肤黑色素瘤细胞A431 人皮肤基底细胞癌A549 人肺癌细胞A875 人黑色素瘤细胞BeWo 人胎盘绒毛癌细胞BGC-823 人胃腺癌细胞BT474 人乳腺导管瘤CACO-2 人结肠癌细胞CaLu-3 人肺腺癌细胞CASKI 人宫颈癌Colo205 人结肠癌Colo320DM 人结肠癌D341 Med 人髓母细胞瘤Daudi 人B淋巴细胞瘤DMF7 双位点HC-KIT
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