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80张/盒
80张/盒
1mm厚度,电转专用
5.5*8.4cm/张,还有7.5*10cm大小的(BE6666),便于实验
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文献和实验80 V)要低于分离胶电泳电压(建议 110-150 V),以达到更好的浓缩效果,使样品进入分离胶时被压缩在同一水平线上。电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处停止电泳,电泳时间约 2-3 小时。 电转(湿转法) 1) 电泳结束后取出凝胶,在电泳缓冲液中(冷藏的)漂洗数秒。按“三明治”模式,打开电转印夹,每侧垫上一块专用的转膜液浸泡透的海绵垫,再各放一块转膜液浸透的蛋白转移垫(定性滤纸),将凝胶平放在阴极侧滤纸上,最后将转膜液浸透并事先用甲醇浸泡的 PVDF 膜平放在凝胶上,去除气泡,夹好电转
); 切记不要用手直接接触 PVDF 膜和滤纸,手上的油脂会对其造成污染,务必佩戴干净的手套,全程尽量使用镊子夹取; 转膜过程中海绵-滤纸-凝胶-PVDF 膜-滤纸-海绵每一层的气泡要排空; 转膜时要使整个电转仪置于冰水混合物中,常用 220V 或者其他高电压进行; 机器温度升高,会使蛋白降解,也就是转膜后,用丽春红染色发现条带跑糊,发光后条带和背景也会脏的一塌糊涂。 5、孵育抗体 孵育一抗的时间大多会选择 4 ℃过夜,也可以室温封闭 2 小时,4 ℃过夜效果会比室温好,4 ℃
以毛细管转移进行Northern Blotting转印实验方法与步骤
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