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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
300T
kFluor647标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
规格:300T适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时,就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠kFluor647,含有kFluor647标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体,可以用于检测小鼠来源的相应一抗,在激光共聚焦显微镜下可以观察到非常明亮的远红外荧光。kFluor647(Ex/Em:651nm/667nm)是一种常用的非常明亮的远红外荧光探针。通常该荧光探针被激发后肉眼不能观察到激发出来的长波长荧光,但可以被很多成像系统例如激光共聚焦显微镜等所检测到。kFluor647的荧光光谱与Cy5比较接近。
本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。
本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。
本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
注意事项
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
4. 如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
5. 需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂,需自备盖玻片和载玻片。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验在生物医学研究中,“看清”细胞内的蛋白表达、捕捉不同分子间的相互作用,是破解疾病机制的关键一步。传统免疫标记技术常受限于灵敏度不足、无法同时标记多个靶点等问题,而TSA技术的出现,彻底打破了这些瓶颈,成为科研人手中的“高分神器”。今天,我们就来聊聊这项风靡实验室的酪酰胺信号放大技术。 高分神器 01 什么是TSA技术?它为何如此强大? TSA,全称Tyramide Signal Amplification(酪酰胺信号放大技术),是一种基于酶学反应的“信号放大器”。想象一下,传统的免疫荧光
Rosa26-EYFP(CD4/EYFP)小鼠脾细胞中观察到,未经处理的活细胞EYFP荧光信号最强;然而,使用FoxP3染色试剂盒(含Fix/Perm和Perm两步法)后,EYFP荧光几乎完全消失。值得注意的是,若在标准染色流程前先用2%多聚甲醛(PFA)进行预固定,则EYFP信号可有效保留。 这一现象表明,荧光丢失并非源于荧光蛋白的化学降解,而是由于Fix/Perm缓冲液固定能力不足,导致可溶性胞质EYFP在后续破膜和洗涤步骤中被被动洗脱出细胞。 怎样解决
物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗,以与后面的SP结合反应;而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗,如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。这主要与后面有无三抗和三抗种类有关。(3)选择IgM还是IgG。一般一抗是IgM,那么二抗就选择IgM;反之,一抗是IgG,则二抗选择IgG。(4)生产厂家。一般SP三步法我们实验室选择中杉金桥的二抗染色试剂盒,内含有工作液的二抗,故试验中只需摸索一抗的浓度即可,效果还可以;而免疫荧光的二抗我一般选择Jackson ImmnoResearch公司
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