超滤膜片，300K 43mm 圆盘膜片，聚醚砜滤膜（Ome

干货：采用不同方法结合提取大量样本细胞外囊泡的对比实验报告

一、分级策略：从高效富集到至极纯化 1：级别一：切向流 提取处理：将293T上清原液过0.22μm滤膜后，使用300K中空纤维柱浓缩10倍，浓缩液过0.22μm滤膜后即为“切向流”级提取产品； 2：级别二：切向流+层析 提取处理： 将293T上清原液过0.22μm滤膜后，使用300K中空纤维柱浓缩10倍，浓缩液过0.22μm滤膜； 过膜后浓缩液过层析柱，收集外泌体馏分； 使用300K中空纤维柱将馏分浓缩10倍后过0.22μm滤膜，得到高纯“切向流+层析”级别的外泌体产品

外泌体大规模提取的秘密都在这了

紫外吸收色谱图收集外泌体样品，浓缩后储存用于下游分析。 规模： 该方法能够从较大体积的培养基中纯化外泌体，通过使用不同滤膜（100 kDa 和 300 kDa）的 TFF 系统进行浓缩和透析，然后通过 BE L-SEC 柱净化，可保留大部分囊泡并提高纯度，适用于大规模外泌体纯化。 关键步骤 [2]： ● 制备培养上清液：从小鼠脾细胞中获得小鼠 CTLs（CD8+T 细胞）和 T 辅助细胞（CD4+T 细胞），培养人 PBMCs、NK-92 细胞、Jurkat 6E-1 细胞和非贴壁 HEK

类器官培养与应用——心脏类器官

，1% penicillin-streptomycin，200mM L-ascorbic）终止消化，将所得细胞用 100μm 孔径滤膜过滤。   hCOs 培养 12、将细胞用 hCOs 形成培养基（I）重悬并进行细胞计数，按照 5,000 个/孔的密度接种于低吸附 96 孔板中。4℃ 条件下 300g 离心 3 min 后，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中过夜培养。 13、用 Matrigel 将每孔细胞进行包埋，放置于 37℃ 培养箱中使 Matrigel 固化。添加 hCOs 形成培养基（II）至完全没过