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文献和实验2、支原体污染时,没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化 3、过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式 4、细胞流通间缺乏品管,造成实验室间的相互污染 5、研究或操作人员忽略污染问题 而支原体污染了来源: 1、已受污染的细胞 2、操作人员的疏失 3、已受污染的培养基、血清 4、操作环境不良、实验器具不洁等 由于支原体为人体口腔中之正常菌丛,实验室之操作人员的污染亦可能为污染源,须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时,最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞
苄青霉素及 140 g/mL X-gal。作为载体的质粒都含有一种或两种抗生素的耐药基因,当把这种质粒转入大肠杆菌后,此菌便获得了抵抗这种抗生素的能力。目前分子克隆所用的克隆载体多含氨苄青霉素耐药基因,所以涉及最多的是氨苄青霉素筛选。当将氨苄青霉素加入培养基中后,只有含质粒的细菌能够繁殖,而不含质粒的细菌则不能繁殖形成菌落。此种筛选不能鉴别重组质粒或自身环化的质粒。在用含氨苄青霉素耐药基因的质粒进行克隆时,转化平板培养基中要加入氨苄青霉素。(四)质粒和菌株的保存:1. 质粒可以在-20 ℃ 冰冻保存。2. 菌株
体污染细胞的Hoechst33258染色结果。 细胞一旦污染支原体,留之又不能,弃之又可惜,所以总要想一些补救措施,现将我所知道的与各位交流一下。 1)化学药物——在上面讲了很多了 2)抗血清处理——特异性多抗 3)6-甲基嘌呤脱氧核敢(6-MPDR)有限稀释法 4)激活巨噬细胞的应用——可在24孔板内每孔加入1ml饲养细胞20万/ml,使形成巨噬细胞单层,再加入所培养的细胞。巨噬细胞培养基中加入四环素、红霉素、tylosin或林可霉素等抗生素,可消除污染 5)克隆法——有限
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