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上海研谨生物科技有限公司
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文献和实验的选择。然而,并非所有的尼龙膜都相同。尼龙配方和生产过程不同,导致膜在同一检测条件下的表现不同。例如,尽管Biodyne B膜和Biodyne Plus膜都带正电,但由于生产方法不同,一个显示极好的敏感性和低自然干扰性,而另一个无此特性而不值得利用(见图5)。其他尼龙6,6膜因有不同的表面化学组成而使信噪比不同。这些不同使人们很难从一种尼龙膜推断另一种的数据及协议。 产品设计者将膜的选择和DNA检测草案完善后,可以获得更好性能的产品。 下面是在选择分子应用膜时开发者应考虑的几个方面。 表 II. 分子诊断学中
Nytran SuPerCharge:带高正电荷的尼龙膜。尼龙膜柔软,强韧,耐折叠,可耐受强度较高的机械操作,这一点上远胜于硝酸纤维素膜,并因而广泛用于膜芯片,Macroarray,或者预制核酸杂交膜上。通常核酸分子在电泳条件下是带负电,尼龙膜上电荷越高,吸附带负电的核酸分子的能力越强,不过蛋白质荷电特性与核酸不同,尼龙膜更常见用于Southern或者Northern。Nytran SuPerCharge经过特殊处理,均匀附着在中间介质两面,表面孔径均一,电荷量是常规带正电核酸膜的3倍
的检测和显色,而且为了防止没有电场的情况下已经分离的蛋白条带扩散,转移要尽快进行转膜的首要是选膜。 Western Blot印迹常用的转移膜主要是硝酸纤维素膜(Nitrocellulose Blotting Membranes,NC)和PVDF膜,此外也有用尼龙膜、DEAE纤维素膜做蛋白印迹。选择的根据主要有:a.膜与目的蛋白分子的结合能力(也就是单位面积的膜能结合蛋白的载量),以及膜的孔径(也就是拦截蛋白的大小);b.不影响后续的显色检测(也就是适和用于所选的显色方法,信噪比好);c.如果后继
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