多孔板 1ML supor膜 5个/包

膜蛋白分离方法

仍可能需要除去去垢剂 . 这常常会引起蛋白质失活，但如果蛋白质是用于测序的，他将不是一个问题 . 如果不是用于测序的，可考虑使用能够黏附去垢剂的疏水珠 . 许多文献和生化试剂供应商的产品目录中，都介绍有许多种不同的可用来溶解膜蛋白的去垢剂 . 然而，他们并不是普遍适用的 . 在设计膜蛋白溶解方案时，必须考虑某一去垢剂的特殊性质 . 如 triton X-100 在 280nm 处有吸收，如果某蛋白质的测试与 280nm 处的吸收有关，就应避免使用这类去垢剂 .将膜制剂与胞质蛋白及细胞

硝酸纤维膜固相杂交

细胞中提取是进行基因诊断的先决条件。制备的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净，又要保持分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取的反应体系中，SDS是离子型表面活性剂，主要作用是：（1）溶解膜蛋白而不破坏细胞 膜；（2）解聚细胞 中的核蛋白；（3）与蛋白质结合，使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将蛋白降解成小的多肽和氨基酸，使分子尽量完整地分离出来。具体方法如下： （一）白细胞的制备 （1）采集外周静脉血10ml，加1.7ml ACD（柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g

请教各位大侠。。。（有关膜蛋白提取的一些问题）

： 1）细胞放在冰上，去除上清，用pH7。4的冷磷酸盐缓冲液洗涤单层细胞两次 2）加入1ml2%TritonX溶液冰浴15min 3)刮下单层细胞，4度下10 000g 5min离心 4）溶液37度水浴 10min以分离水相和去污剂相，然后37度下2 000g离心5min 5)收集水相留作分析 6）用500ul冰冷的buffer C溶解去污剂相沉淀，冰浴2min后加温，在按步骤6再次离心 7）按步骤8再次抽提去污剂相，用buffer C将洗涤后的去污剂相稀释到初始体积 8）用等量