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上海研谨生物科技有限公司
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大量存货
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20个/包
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文献和实验(轻轻摇动)。然后将滤膜移入0.1×SSC和0.5%SDS溶液中;68℃轻轻摇动保温2h,更换缓冲液后继续保温30min。 洗膜的温度一般应控制在低于Tm值12℃以上。(Tm = 69.3 + 0.41x(G +C) %)。双链DNA的Tm值随错配碱基对数每增加1%而递减1℃。 6.结果显示 非放射性检测方法前已述及,此处主要介绍放射性测定方法。固相膜的放射性杂交结果显示有两种方式,一是放射性自显影法,另一种是液闪计数法。前一种方法比较简单,只需将杂交膜与X光片在暗盒中曝光
min。洗膜的温度一般应控制在低于Tm值12℃以上。(Tm = 69.3 0.41x(G C) %)。双链DNA的Tm值随错配碱基对数每增加1%而递减1℃。6.结果显示 非放射性检测方法前已述及,此处主要介绍放射性测定方法。固相膜的放射性杂交结果显示有两种方式,一是放射性自显影法,另一种是液闪计数法。前一种方法比较简单,只需将杂交膜与X光片在暗盒中曝光数小时至数天,再显影、定影即可。对于杂交信号较弱的固相膜,用一块增感屏可显著增强曝光强度。此外,为了减弱32P的散射,曝光通常在-20℃或-80
:1)固定在聚合物基片(尼龙膜,硝酸纤维膜等)表面上的核酸探针或cDN***段,通常用同位素标记的靶基因与其杂交,通过放射显影技术进行检测。这种方法的优点是所需检测设备与目前分子生物学所用的放射显影技术相一致,相对比较成熟。但芯片上探针密度不高,样品和试剂的需求量大,定量检测存在较多问题。2)用点样法固定在玻璃板上的DNA探针阵列,通过与荧光标记的靶基因杂交进行检测。这种方法点阵密度可有较大的提高,各个探针在表面上的结合量也比较一致,但在标准化和批量化生产方面仍有不易克服的困难。3)在玻璃等硬质表面
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