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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
室温
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长期
- 英文名:
4×Tris-HCl-SDS Stacking Gel Buffer, pH6.8
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
250ml
4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液,pH6.8
规格:250ml英文名:4×Tris-HCl-SDS Stacking Gel Buffer, pH6.8
4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中含有0.5 M Tris base, 0.4% SDS,用HCl调至pH6.8,25 ℃。用于SDS-PAGE上层浓缩胶的配制。配制时无需再加10%SDS。
本品为4倍浓缩液,使用时只需稀释成1×工作液即可。
Tris英文名称:Tris base;2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol
分子式:C4H11NO3
分子量:121.14。
储存条件:室温。
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文献和实验(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起
一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,PH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,PH6.8;电泳缓冲液,PH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板,电泳电源架,电泳槽,电泳仪 等;蛋白Mark。 二、方法与步骤 1) 分离胶和浓缩胶配制 按下表比例分别配制分离胶和浓缩胶: 表2-7:聚丙烯酰胺 组成
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