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2—25℃
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一年
- 英文名:
Nitrogen-fixing Rhizobium medium
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
250g
英文名称:Nitrogen-fixing Rhizobium medium
产品规格:250g
固氮根瘤菌培养基产品用途: 用于固氮菌的分离培养
1、 液体培养基:把培养基配好,液体一般5mL就装试管,50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中,高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于,三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌,瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了,自己现做什么的也怪麻烦的。
固氮根瘤菌培养基固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂,一般是100mL装瓶,或者是200mL装瓶(装500mL的三角瓶),灭完菌后,在培养基温度降到一定程度,培养基还呈溶液状态的时候,就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉,不然琼脂就凝固成块块了。当然,灭好菌后,也可以等到要用的时候再倒平板,倒之前微波炉加热,溶解琼脂,冷却到一定温度再倒就行。(建议如果以前从来没弄过固体培养基,也找个人替你操作几次)这部分的内容,可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存,所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉,扔冰箱就行。都准备就绪以后,直接用500-1000uL的培养基溶解干粉,浓度高,接活率高。然后有几种方法可以选择:
1).直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基(已经加了抗性)中,37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间,一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2).为了防止接菌量太少,导致菌体不生长,可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中,37C摇瓶培养,这个按说应该会长得比较快一点,因为通气量大。所以你可以都接上,看情况。
3).还有为了防止污染,会直接取菌液在固体培养基上划线,这样长出来的是单菌落,根据菌落大小和形态,就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高,因为接菌量小,如果菌体活力稍弱,就容易完全不长。
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文献和实验在与植物共生的情况下才能固氮或才能有效地固氮,固氮产物氨可直接为共生体提供氮源。共生固氮效率比自生固氮体系高数十倍。主要有根瘤菌属(Rhizobium)的细菌与豆科植物共生形成的根瘤共生体,弗氏菌属(Frankia)与非豆科植物共生形成的根瘤共生体;某些蓝细菌与植物共生形成的共生体,如念珠藻或鱼腥藻与裸子植物苏铁共生形成苏铁共生体,红萍与鱼腥藻形成的红萍共生体等。在实验条件下培养自生固氮菌,培养基中只需加入碳源(如蔗糖、葡萄糖)和少量无机盐,不需加入氮源,固氮菌可直接利用空气
的多态细胞,称为类菌体。类菌体在根瘤内不生长繁殖,却能与豆科植物共生固氮,对豆科植物生长有良好作用。这两属细菌的表现性状极相似,只是根瘤菌属的细菌在酵母膏、甘露醇、无机盐琼脂上生长快, 3~ 5天的菌落直径可达 2~ 4毫米;在含碳水化合物的培养基上产酸。慢生根瘤菌属的细菌却与之相反,菌落生长甚慢, 5~ 7天其直径还不足 1毫米,在含碳水化合物的培养基上不产酸,反而呈碱性。根瘤菌属是于 1889年由 B.弗兰克建立的,它包括 3种:豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌和百脉根瘤菌。慢生根瘤菌属是 D. C.乔丹
氮是植物生长不可缺少的“维生素”,是合成蛋白质的主要来源。固氮菌擅长空气中取氮,它们能把空气中植物无法吸收的氮气转化成氮肥,源源不断地供植物享用。 在形形色色的固氮菌中,名声最大的要数根瘤菌了。根瘤菌平常生活在土壤中,以动植物残体为养料,自由自在地过着“腐生生活”。当土壤中有相应的豆科植物生长时,根瘤菌便迅速向它的根部靠拢,并从根毛弯曲处进入根部。豆科植物的根部细胞在根瘤菌的刺激下加速分裂、膨大,形成了大大小小的“瘤子”,为根瘤菌提供了理想的活动场所,同时还供应丰富
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