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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
FOXO GFP Reporter Plasmid
- 库存:
920
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1μg
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京现货SY0179型FOXO-GFP报告基因质粒促销,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货SY0179型FOXO-GFP报告基因质粒促销
产地:国产|进口
英文名:FOXO GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
FOXO-GFP报告基因是用于检测FOXO转录活性水平为目的的报告基因。FOXO转录因子家族包括Foxo1,Foxo4,Foxo3a, Foxo6等,它们主要功能包括调节炎症相关细胞的平衡,通过多种不同的信号转导途径参与细胞周期停滞、细胞凋亡和抗氧化应激等免疫相关调节,还在物质代谢等方面也发挥重要作用。
FOXO-GFP报告基因主要用于检测细胞中PI3K/AKT信号通路的活性和FOXO转录因子的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMFOXO-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个FOXO结合位点,可以高效地检测FOXO的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得FOXO-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM FOXO -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMFOXO-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
北京现货SY0179型FOXO-GFP报告基因质粒促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·即用型腔肠素h
编号:SY0236
英文名称:Ready To Use Coelenterazine h
规格:10 vials
本品是即用的腔肠素h,特别设计用于体内成像研究。通过最小化产品成分的变化,最小化冻融次数和严格控制不同批次的产品,确保客户得到高重复性的结果。产品的优点在于:1)溶于丙二醇和柠檬酸的腔肠素h,稳定性高,即开即用,不用考虑粉末配置成液体的稳定性问题。2)预制配方,不同批次间严格控制,特别设计用于体内研究;3)即用型产品通过最小化预成像准备步骤,减少时间和精力;4)经IVIS成像系统验证,控制体内成像质量;
本包装含有10瓶无菌腔肠素h即用型溶液,每瓶含1.2ml浓度为150 μg/mL的Coelenterazine h。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点:
1)能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂;虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。

图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
腔肠素h(Coelenterazineh)是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,其发光强度比天然腔肠素高10倍以上,适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子,可用于检测活细胞中钙离子浓度。
运输和保存方法:冰袋运输。≤-20℃避光保存,最好放到-70℃长期避光保存。
北京现货SY0179型FOXO-GFP报告基因质粒促销关键词:FOXO GFP Reporter Plasmid,SY0179,FOXO-GFP报告基因质粒
·蛋白酶K
编号:SY0001
英文名称:Proteinase K
规格:100mg
Proteinase K(蛋白酶K)是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,其相对分子量约为29.3 kDa,可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,应用广泛,可用于制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶等实验,变性剂如SDS(1%)可提高其活性,常用工作浓度为50-100µg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。
产品特性
1)不含RNase和DNase;
2)来源于基因重组酵母菌株;
3)在尿素和SDS中稳定存在;
4)稀释液:纯水。
5)在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性,最佳pH范围为pH 7.5-8.0
6)反应条件:反应缓冲液中37℃-56℃温育1h;推荐反应温度选择50- 55℃;
7)活力单位定义:在37℃,pH7.5的条件下,每分钟释放1µM酪氨酸所需要的蛋白酶K量定义为1个活性单位。
8)失活方法:反应体系中加入PMSF或DFP抑制剂即可失活,65℃温育10-15min可部分失活。
9)电泳纯度:≥99%
10)酶活性值:≥30U/mg冻干粉
11)比活性值:≥40U/mg 蛋白
储存条件
粉末4℃干燥保存,2年有效。粉末长期不用,可置于-20℃冷冻保存。储存液需≤-20℃保存,避免反复冻融,短期使用可在4℃保存。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)启用后如需长期保存,需置于-20℃~-80℃冰箱冷冻或者过滤除菌。
北京现货SY0179型FOXO-GFP报告基因质粒促销关键词:FOXO GFP Reporter Plasmid,SY0179,FOXO-GFP报告基因质粒
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文献和实验颗粒都明显减少.设计的核酶构建了带有5’-、3’-自身修剪的真核细胞核酶表达质粒,包括含单个核酶和多个***的鸟枪型核酶基因的质粒,通过转染把他们同带有HBV基因组的质粒转入HepG2细胞. 用Southern blot、ELISA、RNase保护法等测定结果后,显示HBsAg、HBcAg、HBeAg以及他们相应的RNA、Dane颗粒数都因为核酶的作用而明显地减少[16]. Puthtz et al学者用重组筛选的方法从一个发夹型核酶文库中(5×109个)确定能有效地在转基因人肝癌细胞(HCC)中
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