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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
High purity plasmid small amount rapid extraction kit
- 库存:
936
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100次|200次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售高纯度质粒提取试剂盒北京厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:高纯度质粒提取试剂盒
编号:ALH078
规格:100次|200次
品牌:百奥莱博
英文名:High purity plasmid small amount rapid extraction kit
本试剂盒适用于小量提取高纯度的质粒。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(50次):
平衡液—————————————10ml
RNaseA(10mg/ml)————————250μl
溶液P1—————————————25ml
溶液P2—————————————25ml
溶液P3—————————————35ml
去蛋白液PE———————————31.5ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.独特的去蛋白液配方,可以高效去除残留的核酸酶,即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议接种单菌落于1.5-4.5 ml加合适抗生素的LB培养基, 过夜培养14-16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5-10 ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,其它步骤相同。
3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
4. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-
20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mMEDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:高纯度质粒小量提取试剂盒(柱式)|高纯度质粒提取试剂盒|高纯度质粒制备试剂盒|高纯度质粒小量提取制备试剂盒
关键词:高纯度质粒制备试剂盒,高纯度质粒小量提取制备试剂盒,高纯度质粒提取试剂盒,高纯度质粒小量提取试剂盒(柱式)
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| 编号 | 名称 |
| ALH378 | PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色) |
| ALH209 | KOD DNA聚合酶 |
| ALH059 | 核酸助沉剂 |
| ALH616 | 重组人KGF-2 |
| ALH375 | 改良Bradford法蛋白定量试剂盒 |
| ALH609 | 高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料) |
| ALH071 | 血液miRNA提取试剂盒 |
| ALH003 | 总RNA提取试剂(组织/细胞/液体样本) |
| ALH089 | 高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) |
| ALH338 | 无缝连接克隆试剂盒 |
| ALH430 | DNA转染试剂 |
| ALH067 | 血浆miRNA提取试剂盒 |
| ALH157 | 细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒 |
| ALH241 | 2×Pfu PCR MasterMix |
| ALH082 | 酵母质粒小量提取试剂盒 |
| ALH154 | 酵母DNA提取试剂盒 |
| ALH031 | RNA提取试剂盒(富含纤维的组织) |
| ALH211 | 高保真PCR MasterMix |
| ALH197 | 一步法荧光定量耐热RT-PCR试剂盒 |
| ALH207 | 植物直接PCR试剂盒(无需提取DNA) |
| ALH191 | 荧光定量反转录PCR试剂盒(两步法) |
| ALH033 | 通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I) |
| ALH353 | DNA快速连接试剂盒 |
| ALH347 | T Simple 载体连接试剂盒(不含多克隆位点) |
| ALH152 | 酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附) |
| ALH195 | 一步法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
| ALH038 | RNA快速提取试剂盒(多糖多酚植物) |
| ALH160 | hoeschst凋亡小体染色试剂盒 |
| ALH090 | 无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取) |
| ALH284 | 2.5mM dNTP混合溶液 |
| ALH022 | 微量样品RNA提取试剂盒 |
| ALH612 | 重组hEGF |
| ALH068 | 细胞组织DNA/RNA/蛋白分离纯化提取试剂盒 |
| ALH387 | 细胞核蛋白/浆蛋白分提试剂盒 |
| ALH048 | 病毒基因组快速提取试剂盒 |
| ALH611 | 长片段DNA超速PCR MasterMix |
| ALH329 | TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术) |
| ALH424 | 强效EB去除剂 |
| ALH379 | 新型蛋白染色试剂盒(替代考马斯亮蓝染色) |
| ALH180 | 尿液DNA提取试剂盒 |
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文献和实验的时间和精力,最后因为试剂盒的问题影响实验的进度有点得不偿失,而且脂质体都比较贵。因此,性价比是最重要的因素。大部分的质粒提取试剂盒所得产物可分为如下几个级别:1.高级转染级:这是最高纯度的去内毒素的质粒纯化,主要使用于基因治疗,cell显微注射,原代细胞转染等。2.常规转染级:它要优于2次cscl超速离心纯化的质粒。3.分子生物学级,相当于1次cscl超速离心纯化的质粒。4.测序级:主要用于常规酶切与连接用。我们实验室用过qiagene,axgene,omiga和国产天根的。大家对qiagene
有浪费的嫌疑(当然经费充足无可厚非)。但是有些国产的试剂盒不怎么令然放心,象楼主这样做稳定转染 的,要花费很多的时间和精力,最后因为试剂盒的问题影响实验的进度有点得不偿失,而且脂质体都比较贵。因此,性价比是最重要的因素。大部分的质粒提取试剂盒所得产物可分为如下几个级别: 1.高级转染 级:这是最高纯度的去内毒素的质粒纯化,主要使用于基因治疗,cell显微注射,原代细胞转染等。 2.常规转染 级:它要优于2次cscl超速离心纯化的质粒。 3.分子 生物
【原创】OMEGA质粒提取试剂盒说明书: 给刚进实验室,又需要做质粒提取的XDJM
自己的实验刚刚开始,又涉及到质粒的提取。翻译了OMEGA 的大/小规模质粒提取试剂盒的说明书(D6922-01和D6942-01)。希望能给和我一样的新手一点帮助,同时请大家指正多给建议,特别是自己的心得啊。全是自己打的,帮顶让大家都能下啊:)E.Z.N.A Plasmid Miniprep Protocol 质粒小规模提取试剂盒Product Number D6942 and D6943,D6944注意:1. 使用之前,把试剂盒中的一小管RNA酶加入溶液Ⅰ. 4℃保存2. 加60ml
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