Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-formed Fibrils(2型)
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Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

rmed Fibrils(2型)
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  • 加拿大
  • SPR-317
  • 2025年11月18日
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    • 保存条件

      -80ºC

    • 保质期

      一年

    • 英文名

      Alpha Synuclein Pre-formed Fibrils (Type 2)

    • 库存

      大量

    • 供应商

      StressMarq

    • 规格

      100 µg/100 µg x2/100 µg x5

    规格:100 µg产品价格:询价
    规格:100 µg x2产品价格:询价
    规格:100 µg x5产品价格:询价
    产品名称Alpha Synuclein 蛋白
    产品描述

    活性重组人Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-formed Fibrils (2型)

    应用范围WBSDS-PAGEIn vivo assayIn vitro assay
    浓度2 mg/ml
    标记物无标签
     
    性质重组
    来源物种
    表达系统大肠杆菌 (E. coli)
    氨基酸序列MDVFMKGLSK AKEGVVAAAE KTKQGVAEAA GKTKEGVLYV GSKTKEGVVH GVATVAEKTK EQVTNVGGAV VTGVTAVAQK TVEGAGSIAA ATGFVKKDQL GKNEEGAPQE GILEDMPVDP DNEAYEMPSE EGYQDYEPEA
    纯度>95%
    蛋白长度全长蛋白
    Full Biological Activity在Sprague-Dawley 大鼠原代海马神经元中不会引起路易小体的形成。硫黄素 T 发射曲线显示当 2 型 alpha synuclein PFFs (SPR-317) 和 alpha synuclein 单体 (SPR-321 或 SPR-316) 混合时只有少量的荧光强度增加 (荧光强度增加代表 alpha synuclein 的聚集)。然而 2 型 alpha synuclein PFFs (SPR-317) 不排除在其他神经元细胞中有特定的生物学活性,研究者应在使用前测试蛋白性能。

    产品特性

    储存缓冲液PBS pH 7.3
    储存温度-80ºC
    运输温度干冰. 运输: 该产品会与其他同订单产品分开发货.
    纯化方式离子交换层析纯化
    Protein Size分子量~14.46 kDa
    引用该产品Human Recombinant Alpha Synuclein Protein (StressMarq Biosciences, Canada, Cat # SPR-317)
    分析证书该蛋白已经通过SDS-PAGE检测证明纯度大于95%. 由低内毒素单体制成.
    其他相关信息为达到最佳效果请在使用前超声处理. 请参考官网上神经退行性疾病相关蛋白操作指南或产品说明书. 单体来源是目录号# SPR-316.

    生物学特性

    别名Alpha synuclein pre-formed fibrils, Alpha synuclein aggregates, Alpha synuclein Protein aggregates, Alpha synuclein aggregates, Alpha-synuclein Protein, Non-A beta component of AD amyloid Protein, Non-A4 component of amyloid precursor Protein, NACP Protein, SNCA Protein, NACP Protein, PARK1 Protein, SYN Protein, Parkison disease familial 1 Protein
    研究领域神经纤维缠结&Tau, 神经退行性疾病, 突触核蛋白, 神经生物学, 帕金森氏病, 阿尔茨海默病
    细胞定位细胞核, 细胞质, 膜
    Accession NumberNP_000336.1
    GeneID6622
    Swiss ProtP37840
    科研背景Alpha-Synuclein (SNCA) is expressed predominantly in the brain, where it is concentrated in presynaptic nerve terminals (1). Alpha-synuclein is highly expressed in the mitochondria of the olfactory bulb, hippocampus, striatum and thalamus (2). Functionally, it has been shown to significantly interact with tubulin (3), and may serve as a potential microtubule-associated protein. It has also been found to be essential for normal development of the cognitive functions; inactivation may lead to impaired spatial learning and working memory (4). SNCA fibrillar aggregates represent the major non A-beta component of Alzheimers disease amyloid plaque, and a major component of Lewy body inclusions, and Parkinson’s disease. Parkinson's disease (PD) is a common neurodegenerative disorder characterized by the progressive accumulation in selected neurons of protein inclusions containing alpha-synuclein and ubiquitin (5, 6).
    参考资料1. “Genetics Home Reference: SNCA”. US National Library of Medicine. (2013).
    2. Zhang L., et al. (2008) Brain Res. 1244: 40-52.
    3. Alim M.A., et al. (2002) J Biol Chem. 277(3): 2112-2117.
    4. Kokhan V.S., Afanasyeva M.A., Van’kin G. (2012) Behav. Brain. Res. 231(1): 226-230.
    5. Spillantini M.G., et al. (1997) Nature. 388(6645): 839-840.
    6. Mezey E., et al. (1998) Nat Med. 4(7): 755-757.

    产品图片

    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

    2 型 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (PFFs)(SPR-317) 的透射电镜图 (TEM).

     

    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

    使用 Bioruptor Pico 进行 30 次高频超声处理后,对 2 型 Alpha 突触核蛋白原纤维 (SPR-317) 进行 TEM 扫描。使用磷钨酸和醋酸铀酰染色,在碳涂层 400 目铜网格上以 80 Kv 获得负染色透射电子显微镜 (TEM) 图像。比例尺 = 200 nm。

     

    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

    UV-CD数据显示StressMarq的 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (PFF), 1型 (货号SPR-322) 和2型 (货号SPR-317) 都含有较高的 beta 折叠, 然而他们的二级结构也确实有微小的差别。StressMarq的Alpha突触核蛋白单体 (货号SPR-316) 在200nm处显示出强烈的负信号,暗示着无序的蛋白状态 (缺乏二级结构). 在这个实验中, 前体原纤维 (PFF)在UV-CD前 进行了10次超声处理来确保测量之前的可溶性。

    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo
    SDS-PAGE of ~14 kDa重组人 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (2型) (SPR-317). 泳道 1: 分子量梯 (MW). 泳道 2: 2型 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (SPR-317).
    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

    1型突触核蛋白 (α-Syn) 前体原纤维 (SPR-322) 催化1型单体(SPR-321)形成新的前体原纤维. 硫黄素 T 是一种荧光染料, 可以绑定富含beta折叠的结构, 例如 α-Syn 前体原纤维. 绑定之后, 硫黄素T光谱会发生红移, 荧光强度会增强. 左侧硫黄素 T 发射光曲线展示了四种试验对象随时间增强的荧光强度(相关于α-Syn 蛋白前体原纤维),其中 10 μM 1型 α-Syn 前体原纤维(SPR-322) 与100 μm 1型 α-Syn 单体 (SPR-321) 混合物荧光增强最明显, 另外几组对比分别是1型 α-Syn 前体原纤维 (SPR-322) 、1型 α-Syn 单体 (SPR-321) 以及 硫*磺素Tλex = 450 nm, λem = 485 nm.

    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

    原代大鼠海马体神经元被 1型突触核蛋白前体原纤维 (SPR-322) 4 µg/ml (D-F) 处理后显示路易体内含物的形成,而当被 2型突触核蛋白前体原纤维(SPR-317) 4 µg/ml (A-C)处理时没有路易体内含物形成. 组织: 原代海马体神经元. 物种: 斯普拉-道来氏大鼠. 固定: 由PFA制作的4% 甲醛. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗体, 稀释度 1:1000, 4°C下处理24 小时. 二抗: FITC 羊抗小鼠 (绿色) 稀释度 1:700室温下孵育1小时 (B, E). 复染色: Hoechst (蓝色) 细胞核染色, 1:4000 室温下孵育1小时 (A, D). 细胞定位: 路易体内含物. 放大倍数: 20x.C 是 A 和 B 的复合图,F 是 D 和 E 的复合图.

    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo
    活性重组人 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (2型) (货号. SPR-317) 和活性重组人 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (1型) (货号. SPR-322)的毒性对照. 活细胞成像后的数据绘图步骤如下: 体外孵育 8天后, 原代大鼠混合皮质神经元细胞用 1X PBS清洗后分别用500 µg/ml 1型 和 2型 Alpha 突触核蛋白 37˚C 孵育20小时. 处理之后, 细胞用2X PBS 冲洗之后用染剂 (2.0 µM Cell Event + 2.5 µM Ethidium homodimer + 2.5 µg/ml Hoechst 33342 in sterile HBSS) 37˚C孵育30分钟. 2型 Alpha 突触核蛋白的加入导致了明显的细胞死亡增加.
    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

    原代小鼠皮质神经元a-syn毒性评估. 乳酸脱氢酶 (LDH)是在细胞死亡的时候释放的一种存在于细胞质基质中的可溶性酶. 毒性由 LDH 测试决定,显示为相对于空白对照 (VC)的%. 数据呈现为柱状图和标准差. 数据分析使用的是单向方差 (One-way ANOVA) 和 Bonferroni post-hoc 测试 (vs VC). *** p<0.001. 使用alpha突触核蛋白单体处理对LDH释放没有明显影响. 数据由QPS提供.

    Alpha Synuclein 蛋白前体原纤维 Pre-fo

    原代小鼠皮质神经元a-syn毒性评估. 线粒体脱氢酶活性将黄色MTT还原为深蓝色甲瓒晶体, 一种在活细胞中产生的反应. 细胞存活率由 MTT测试决定,显示为相对于空白对照 (VC)的%. 数据呈现为柱状图和标准差. 数据分析使用的是单向方差 (One-way ANOVA) 和 Bonferroni post-hoc 测试 (vs VC). ** p<0.01, *** p<0.001. 2 型PFFs 降低了细胞存活率 (p<0.001). 数据由QPS提供.

     

     

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    • Flow cytometric isolation of drug-like conformational antibodies specific for amyloid fibrils.

    Desai, A.A. et al. (2023) bioRxiv. 2023.07.04.547698.

    PubMed ID: 37461643 应用范围: Western Blot Control

    • α-Synuclein uptake, accumulation, and inflammatory responses in Parkinson's disease.

    Stevenson, T.J. (2021) PhD Thesis.

    PubMed ID: N/A 应用范围: Aggregation Assay

    • Directed Evolution Of Antibodies Against Complex Targets

    Desai, A. (2021) PhD Thesis Doctoral Dissertations.

    PubMed ID: N/A 应用范围: Aggregation Assay

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