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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验很强,略贵点。phusion 虽不贵,但是这个酶很怪异,每次用都要把 annealing 温度调高好几度,否则就出杂带。 个人觉得 NEB 内切酶绝对是 NO.1,但是 Taq 就不如 Invitrogen 了。如果实验室有钱,直接买 Invitrogen 的 spuermix,什么都混好了,连 ddH2O 都搞定。只要直接向里加模版和引物就 OK,每次我要拿漂亮的结果都用 supermix。 还是那句话,读说明书。同是高保真 Taq 酶,iproof 要求 98 度起始
® DNA聚合酶用量更少,而产量更高。正是这些独特的优点,使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。 超保真 ——克隆好帮手 如果你下一步打算克隆,那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。它的错配率极低,是高保真PCR的理想选择。利用改良的lacI方法检测,在HF缓冲液中,该酶的错配率为4x10-7。这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍,比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。需要提醒的是,Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR
物,也不用担心抑制不稳定,使用起来方便、高效。此外,由于几乎所有的Taq酶产品都带有相应的反应缓冲液,缓冲液的品质也对保证Taq酶特异性扩增起着不可忽视的作用,一般的缓冲液中调节H键作用的盐只有KCl,QIAGEN公司的缓冲体系通过KCl、(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节也提高了酶作用的特异性。 此外,热启动的Taq酶也是实现一步法RT-PCR的基础。如QIAGEN公司的OneStep RT-PCR试剂盒,在RT反应较低温度下,Taq酶没有活性,逆转录酶发挥活性;RT反应结束,高温灭活逆转
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