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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验Western Blotting 膜法学堂:选择正确的转印膜,优化
有另外一种情况也是需要选择特殊型号的转印膜,那就是荧光检测的Western Blotting实验。普通型号的Immobilon-P 的PVDF膜由于有高荧光背景而不适合荧光检测。硝酸纤维素膜荧光背景较弱,有些老师也会用于Western Blotting的荧光检测,但也有老师抱怨检测信号不如使用PVDF膜的化学发光强,较弱的条带不易检测。针对这种情况,低荧光背景的Immobilon-FL 型号PVDF膜被研发出来了。Immobilon-FL 型号由于具有比硝酸纤维素膜更低的自发荧光背景,同时又保留
~70 min 设备名字是“Bio-Rad mini”。 蛋白来源:乳鼠心肌细胞和成年鼠心肌组织 总蛋白和核蛋白 蛋白名称(可保密):保密 蛋白分子量:65 KD & 55 KD WB用膜类型、孔径:PVDF(预先用甲醇处理) 转膜方式(恒压、恒流):半干转 恒压 12 V 转膜时间:30-40 min 设备:“Bio-Rad mini
探针。荧光染料可以是Cy3、Cy5、FITC、fluorescein、Texas red、rhodamine、bodipy或者Alexa dye,而且各种荧光染料的标记效率相当。值得一提的是这种间接荧光标记比直接标记法的效率更高,在双色荧光标记时,可以避免直标法因为Cy5标记效率低而导致Cy3、Cy5两种颜色信号强度不同的现象。试剂盒提供除荧光染料外的全部试剂,足够作10次标记。 6)Vysis公司的Microarray Nick Translation Kit 是配合Vysis公司
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