转印试剂盒，Mini，PVDF膜，40次

各类western转膜条件

~70 min 设备名字是“Bio-Rad mini”。 蛋白来源：乳鼠心肌细胞和成年鼠心肌组织 总蛋白和核蛋白 蛋白名称（可保密）：保密 蛋白分子量：65 KD & 55 KD WB用膜类型、孔径：PVDF（预先用甲醇处理） 转膜方式（恒压、恒流）：半干转 恒压 12 V 转膜时间：30-40 min 设备：“Bio-Rad mini

western blotting的转膜步骤

相关专题   下面的步骤适用于通过XCell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。 I. 所需材料： •Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）•电泳后的迷你胶（mini-gel）（最大的尺寸9cm*9cm）•预先切割好的印记膜： 硝酸纤维素（Cat. no. LC2000或LC

WB实战指南（三） 之 转印

易碎。当然目前某些厂家为解决这个问题，将NC成分涂在另一种介质的表面，这种膜的支持强度和PVDF膜类似，但转膜效率稍差于纯NC膜，且有明显的正反面；因此制作转印三明治的时候要特别注意正反面。此外，20KDa以下的蛋白宜采用0.22uM孔径的转印膜，但也不是一定必须。对于大蛋白转印，很多书本建议采用低浓度胶，如6% SDS-PAGE。但实际操作发现，6%太软，制作转印三明治的操作非常麻烦；且内参如Actin、tubulin都在45KDa附近，而6%胶底边溴酚蓝指示60KDa左右，除非采用坛子上有