银染Plus还原剂，100ml

免疫金银染色（immuno gold silver staining，IGSS）

IGSS的主要 试剂 为银染液。以往一般用硝酸银染液，但其对光的稳定性较差；改用乙酸银溶液后稳定性加强，配方如下： 　　A液：0.22％乙酸银溶液（乙酸银110mg溶于去离子水50ml中）。 　　B液：50％阿拉伯树胶溶液（阿拉伯树胶50g溶于去离子水100ml中，每天振摇3次，5天后过滤使用）。 　　C液：1％对苯二酚溶液（对苯二酚500mg溶于0.55mol/LpH3.8的柠檬酸盐缓冲液50ml中）。 　　D液：在C液中加入B液

SDS-PAGE蛋白质电泳常见问题分析

1、还原SDS处理：在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后，蛋白质构象被解离，电荷被中和，形成SDS与蛋白相结合的分子，在电泳中，只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理，样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，离心，沸水煮5min，再离心加样。 2、带有烷基化作用的还原SDS处理：碘乙酸胺的烷基化作用可以很好的并经久牢固的保护SH基团，得到较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT，而防止银染时的纹理现象。100μl样品缓冲液中10μl 20%的碘

【求助】请教聚丙烯酰胺凝胶嗲用问题

bluesky0902 请教各位：为什么条带这么不清晰呢？而Marker还可以，是电泳的问题，胶的问题还是染色的问题呢？刚开始做，是在搞不明白~·电泳是非变性聚丙烯，染色步骤如下： 染色步骤： 1. 固定液：100%冰醋酸2ml，无水乙醇40ml加水至400ml，摇7-8min 2. 银染液：0.6g硝酸银加水至300ml，摇12-15min 3. 加水洗1-2次，每次1min