加样梳，21cm，1.5mm，15孔

垂直电泳槽的使用

•如只运行一块凝胶，则需要把胶门（很厚的玻璃板）插入到电极空着的一边。将SDS-PAGE电泳缓冲液倒入凝胶三明治夹与胶门之间，直到缓冲液表面距离玻璃板上缘1cm（图 11）。检查是否有渗漏。将1升的SDS-PAGE电泳缓冲液倒入槽内凝胶组件的周围。 样品制备和装载： •将试管插入至制冷恒温金属浴（4℃），以解冻冷冻牛血清白蛋白（BSA）（1 mg/ml）样品。 然后，加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。 •把样品加样到凝胶中前, 请在恒温金属浴中以

聚丙烯酰胺凝胶电泳

2cm处，立即在其表面覆盖少量蒸馏水，静置1小时左右，当见到水层下面有一清晰的界面时，则表明胶已聚合凝固，用吸水纸小心吸去上面水层。4、 浓缩胶：按2∶4∶5∶6=1∶2∶1∶4的比例，同上法制备浓缩胶，连续平稳加入浓缩胶至离边缘5mm处,迅速插入样梳,静置40分钟。电泳步骤：1、 拔出样梳后,在上槽内加入缓冲液,没过锯齿时可拆去底端的琼脂糖。2、 用微量注射器距槽底三分之一处进样,加样前,样品在沸水中加热3分钟，去掉亚稳态聚合。3、 电泳槽中加入缓冲液，接通电源，进行电泳，开始电流恒定在10

小鼠白细胞介素21（IL-21）酶联免疫分析（ELISA）

上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可 将标本放于 -20 ℃保存，但 应 避免反复冻融 . 7.  不能检测含NaN3的样品 ，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP ）活性。 操作步骤 1.  标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品 100 μ l，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50 μ l，混匀；然后从第一孔