加样梳，21cm，1.5mm，45孔

垂直电泳槽的使用

•如只运行一块凝胶，则需要把胶门（很厚的玻璃板）插入到电极空着的一边。将SDS-PAGE电泳缓冲液倒入凝胶三明治夹与胶门之间，直到缓冲液表面距离玻璃板上缘1cm（图 11）。检查是否有渗漏。将1升的SDS-PAGE电泳缓冲液倒入槽内凝胶组件的周围。 样品制备和装载： •将试管插入至制冷恒温金属浴（4℃），以解冻冷冻牛血清白蛋白（BSA）（1 mg/ml）样品。 然后，加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。 •把样品加样到凝胶中前, 请在恒温金属浴中以

聚丙烯酰胺凝胶电泳

2cm处，立即在其表面覆盖少量蒸馏水，静置1小时左右，当见到水层下面有一清晰的界面时，则表明胶已聚合凝固，用吸水纸小心吸去上面水层。4、 浓缩胶：按2∶4∶5∶6=1∶2∶1∶4的比例，同上法制备浓缩胶，连续平稳加入浓缩胶至离边缘5mm处,迅速插入样梳,静置40分钟。电泳步骤：1、 拔出样梳后,在上槽内加入缓冲液,没过锯齿时可拆去底端的琼脂糖。2、 用微量注射器距槽底三分之一处进样,加样前,样品在沸水中加热3分钟，去掉亚稳态聚合。3、 电泳槽中加入缓冲液，接通电源，进行电泳，开始电流恒定在10

免疫沉淀反应（二）——琼脂扩散实验

及1：10稀释的待检血清，每孔10 μl，此时加入的抗原液面应与琼脂板一平，不得外溢。 （4）已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。 （5）测定各孔形成的沉淀环直径（mm），用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线，再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。 二、双向琼脂扩散实验 1. 材料 （1）诊断血清：兔抗人血清 （2）待测血清：人血清 （3）阴性对照血清 （4）其它：生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。 2. 方法 （1）取一清