加样梳转换螺纹夹

垂直电泳槽的使用

实验材料 •BSA（1 mg/ml），0.05 g的BSA(Sigma-Aldrich Ltd.)溶于50ml ddH2O中，每Eppendorf管约加入1ml溶液，并在-20℃下冷冻。 •预染色marker (Bio-Rad) •ProMarker(Wealtec) •两套玻璃板与校正卡，厚玻璃板与U形玻璃板，0.75 mm厚胶条和一个0.75 mm 10齿梳（Wealtec） •浓度为12％的SDS-PAGE分离胶（0.75 mm）;2.31 ml ddH

western操作步骤

相关专题Western Blot技术专题 1.制胶及上样： (1)配制12%SDS-PAGE 分离胶，混匀后注入边条厚度为2mm的两块洁净玻璃板间，其上加一薄层异丙醇，室温下静置至凝固。 (2)待分离胶完全聚合后，倾去其上的水层，以吸水纸吸净残余液体，插入加样梳，缓缓加入浓缩胶，使其充满加样梳间的空隙，室温下静置。待胶完全聚合。 (3)将凝胶固定于电泳装置上，上、下槽加入电泳缓冲液。

聚丙烯酰胺凝胶电泳protocal

在物体上，使 成10°角，可减少液体泄漏的机会. 　　6.室温聚合一小时后，将玻璃板插入电泳槽中，上紧，倒入0.1XTBE 缓冲液. 　　7.小心取出梳子，立即用缓冲液冲洗加样孔，因为梳子取出后，梳 子上吸附的及凝胶顶部未聚合的丙烯酰胺会流入加样孔内聚合，产 生不规则的表面，将导致以后DNA电泳带型不规则. 　　8.将DNA样品与适量的载样缓冲液混匀后，加到样品孔内，加样时不 要产生气泡. 　　9.接好电极，电压为1-8V/cm，进行电泳. 　　10.根据指示剂迁移位置来判定是否