两性电解质，pH3.9-5.1，100x，1ml

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点（图）

形式的电泳的优点是节省两性电解质试剂、加样数量多、利于比较不同样品的电泳结果，而且电泳后的固定、染色和干燥都很方便、迅速。水平板式等电聚焦电泳的最大优点是防止了由于电极液的电渗作用而引起pH梯度的漂变。 三、器材及试剂： 1．器材： 稳流稳压电源，水冷式平板等电聚焦电泳电槽，玻璃板（11.5×11.5×0.2cm），大铁文具夹，塑料模具（厚0.5mm，中间开孔9.0×9.0cm），小眼科剪子，镊子，解剖刀，1ml注射器，50μl和100μl微量注射器，擦镜纸，滤纸，精密pH试纸，凝血板

电泳技术

200V/cm时为高压电泳。电场强度大，带电质点的迁移率加速，因此省时，但因产生大量热量，应配备冷却装置以维持恒温。⒉溶液的pH值 溶液的pH决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。例如蛋白质分子，它是既有酸性基团（-COOH），又有碱性基团（-NH2）的两性电解质，在某一溶液中所带正负电荷相等，即分子的净电荷等于零，此时，蛋白质在电场中不再移动，溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点（isoelctric point，pI）。若溶液pH处于等电点酸侧，即pH＜pl，则蛋白质带正电

等电聚焦电泳介绍

聚焦凝胶的配方。其他pH范围等电聚焦可以参考表格来配置。水：5.4ml； 储存液1）：2.0 ml； 载体两性电解质溶液pH3.5-10 48μl； 载体两性电解质溶液pH4-6 240μl； 超纯尿素 6.0 g ；10%过硫酸胺25μl； TEMED：20μl灌胶步骤：1.组装灌胶器；2.将尿素、水、溶液和载体两性电解质溶液混匀，避免剧烈摇动，轻微加热尿素溶解更快（带手套，丙稀酰胺有毒）；3.加入过硫酸胺和TEMED，轻轻混匀（开始聚合，操作要迅速）；4.将上述混匀溶液倒如灌胶器（尽量避免气泡产生