Oriole荧光凝胶染料，5L

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

于上佳的上样缓冲液中，可产生相等或预期强度的条带，并且不含有条带污点，无染色阴影。与此相反，分子量标准 #1 采用较老技术制造，并存在于次优组分的缓冲液中。 b. 样品和标准品准备 须计算上样到凝胶中的 DNA 量，以确保目的条带良好分离，并用于可视化和检测。虽然用荧光染料足以检测 1 - 100 ng/条带的 DNA，但最小可检测量取决于 所用染料(了解更多: 核酸染色特性）[2]。注意，样品或标准品的超载会造成条带污点并遮盖附近条带，从而导致条带分辨不清，特别是片段大小相似时(图 2A)。 图

无毒核酸电泳染料SUPER Green I使用方法

         SUPER Green Ⅰ（10,000× DMSO溶液，电泳级） SUPER Green Ⅰ核酸染料特点 ●  无毒性：属花箐类染料，容易生物降解，无致癌毒性。 ●  灵敏度高：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25～100倍。 ●  信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。 ●  操作简单：无须脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。 ●  适用范围广：可适用于多种凝胶

经验优化与高级技巧篇

； ②Qubit 准确度更高：蛋白质、游离核苷酸、EDTA 等物质在 260nm 处也存在吸收峰，从而影响紫外分光光度计定量的准确度，而荧光染料仅与目标核酸特异性结合，不受其他杂质影响，qubit 成为精准定量的 「金标准」； ③Qubit 检测范围更精准：紫外分光光度计检测范围较宽（通常 ng/μL-μg/μL），但低浓度（ ④紫外分光光度计操作更简单，成本更低：紫外分光光度计可以直接点样进行定量，无需专业试剂；而 Qubit 法需经加染料、孵育等步骤，再用仪器检测，依赖于专门的染料，仪器价格更贵