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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验缓冲液(pH 8.3):Tris 3.02 g,甘氨酸 18.8 g,10% SDS 10ml加ddH2O溶解, 定容至100ml。 6、10%过硫酸铵(AP): 1gAP加ddH2O至10ml。 7、2´SDS电泳上样缓冲液:1M Tris-HCl (pH 6.8)2.5ml,b-巯基乙醇1.0ml,SDS 0.6 g,甘油 2.0ml,0.1%溴酚兰 1.0ml,ddH2O 3.5ml。 8、考马斯亮兰染色液:考马斯亮兰 0.25 g,甲醇225ml,冰醋酸 46ml,ddH2O 225
10%SDS 0.02 ml 10%AP 0.02 ml TEMED 2 μl将分离胶上的水倒去,加入上述混合液,立即将梳子插入玻璃板间,完全聚合需15~30min。 (二)样品处理:将样品加入等量的2×SDS上样缓冲液,100℃加热3~5min,离心12000g×1min,取上清作SDS-PAGE分析,同时将SDS低分子量蛋白标准品作平行处理。 (三)上样:取10μl诱导与未诱导的处理后的样品加入样品池中,并加入20μl低分子量蛋白标准品作对照。 (四) 电泳:在电泳槽中加入1´电泳
Tris-HCl0.25 ml 10%SDS 0.02 ml 10%AP 0.02 ml TEMED 2 μl 将分离胶上的水倒去,加入上述混合液,立即将梳子插入玻璃板间,完全聚合需15-30min。 (二)样品处理:将样品加入等量的2×SDS上样缓冲液,100℃加热3-5min,离心12000g×1min,取上清作SDS-PAGE分析,同时将SDS低分子量蛋白标准品作平行处理。 (三)上样: 取10μl诱导与未诱导的处理后的样品加入样品池中,并加入20μl低分子量蛋白标准品作
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