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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇,1ml 1%溴酚蓝,0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液:在通风橱中,称取丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯酰胺0.8g,加重蒸水溶解后,定容到100ml。过滤后置棕色瓶中,4℃保存,一般可放置1个月。3. pH8.9分离胶缓冲液: Tris 36.3g ,加1mol/L HCl 48ml,加重蒸水80ml使其溶解,调pH8.9,定容至100ml, 4℃保存。4. pH6.7浓缩胶缓冲液: Tris 5.98
化物酶同工酶的红褐色酶谱。该酶活性染色过程如下:过氧化物酶分解H2O2 产生氧基,后者使联大茴香胺发生反应生成褐色化合物。所以用染色液浸泡凝胶时,有过氧化物酶同工酶蛋白质条带的部位便出现褐色的谱带。倒掉染色液,重新加入7%的乙酸溶液,于日光灯下观察记录酶谱,绘图或照相。 五、附注 1.如果室温较高,可适当减少电流,延长电泳时间,或采取降温措施,以免温度过高造成酶活损失。 2.工业纯丙烯酰胺(Acr)和甲叉双丙烯酰胺(Bis)的纯化方法 (1)Acr的纯化 称取70g的Acr,于50℃溶于
酶。二、材料、仪器设备及试剂(一)材料:小麦芽(二)仪器设备: 1.稳流稳压电泳仪;2.冷冻离心机及离心管;3.成套电泳槽(圆盘型);4.pH试纸;5.其它常规用具。(三)试剂: 1.分离胶缓冲液(pH8.9):1mol/L HCl48ml,Tris36.6g,TEMED0.23ml,加水定容至100ml。2.分离胶贮液:30g丙烯酰胺,0.8g甲叉双丙烯酰胺,加水溶解并定容至100ml,过滤后使用。3.过硫酸铵溶液:过硫酸铵0.2g,加水定容至100ml制胶时现配现用)。4.浓缩胶缓冲液:1mol
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