甲叉双丙烯酰胺溶液，2%，2x500ml

2D 凝胶的蛋白 Edman 测序

图谱程序来确定蛋白 N 端或内部的序列。2. 材料 ( 1 ) SDS 抽样缓冲液：0.06 mol/L Tris-HCl ( pH 6.8)，2% SDS，10% 甘油，5% 巯基乙醇。 ( 2 ) 分离胶用的丙烯酰胺（丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺= 30：0.135)：30.00 g 丙烯酰胺，0.135 g 甲叉双丙烯酰胺（BIS ) 。用 MQ ( Millipore 公司的 MilliQ 净水设备处理过的水）水定容至 100 ml，黑暗中保存（可使用棕色

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶

化物酶同工酶的红褐色酶谱。该酶活性染色过程如下：过氧化物酶分解H2O2 产生氧基，后者使联大茴香胺发生反应生成褐色化合物。所以用染色液浸泡凝胶时，有过氧化物酶同工酶蛋白质条带的部位便出现褐色的谱带。倒掉染色液，重新加入7%的乙酸溶液，于日光灯下观察记录酶谱，绘图或照相。 五、附注 1．如果室温较高，可适当减少电流，延长电泳时间，或采取降温措施，以免温度过高造成酶活损失。 2．工业纯丙烯酰胺（Acr）和甲叉双丙烯酰胺（Bis）的纯化方法 （1）Acr的纯化 称取70g的Acr，于50℃溶于

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点（图）

，培养皿（120mm），脱脂棉，棕色试剂瓶，吸液管，吸耳球，玻璃纸，坐标纸。 2．试剂： 重蒸水，丙烯酰胺（重结晶），甲叉双丙烯酰胺（重结晶），过硫酸铵，TEMED（四甲基乙二胺），载体两性电解质（pH3.5～10），考马氏亮蓝R250，液体石腊，乙醇（95%），硅油，磺基水杨酸，三氯乙酸，甲醇，乙酸（36%），已知pI蛋白质样品和标准等电聚焦样品（市售），磷酸，氢氧化钠。 3．溶液配制： （1）单体贮液：丙烯酰胺2.91g，甲叉双丙烯酰胺0.9g，重蒸水溶解，定容到100ml，过滤