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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验Hoechst 33258染色1.原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时,Hoechst-DNA发出亮
二者区别不大,但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色! 这么说来,如果您用hoechst和PI做对活细胞进行双标,那么就最好选择hoechst33342,这是就可以直接将染料加入培养液中,之后固定观察;但是如果一定要用hoechsts33258,那么就最好是:固定-->染色-->观察”。由于当时我只订到了hoechsts33258,所以我就参考了你的帖子。那我再试试先
PriCells: 利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞
利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞 试剂和材料: 1. 2—4代的间质细胞; 2. HBSS/2FB; 3. Hoechst 33342染料,1mg/ml水溶; 4. 碘化丙啶(PI),2mg/ml水溶; 5. 维拉帕米,500μg/ml水溶; 6. DEME/2FB; 7. 胰蛋白酶/TrypLE:TrypLE Express或0.25%胰蛋白酶,溶于CMF-Saline G; 8. MoFlo(或与其类似的)高速细胞分选仪,具备350nm激发能力
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