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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验填料 离子交换层析填料主要有基架和配基两部分组成,其中基架的类型和粒径大小决定了填料的耐压、流速、分辨率等,粒径越小,填料的分辨率越高,而同等高度的层析柱带来的反压也相对较大,而配基是实际和样品中生物分子结合的基团。 离子交换填料的配基根据离子交换层析类型的不同分为阴离子交换配基及阳离子交换配基,常见的离子交换填料配基类型 (如表6),在离子交换填料选择时,优先考虑强离子交换配基,如阴离子配基Q、阳离子配基S等,如果强离子交换配基无法得到满意的结果,也可以考虑使用弱离子交换配基为层析带来不同的选择
阴离子交换层析。 阳离子交换剂 带负电荷,与混合物中带正电的组分结合 阳离子交换层析。 常用离子交换剂有:离子交换树脂,离子交换纤维素等 本实验用到的是二乙基氨基纤维素即DEAE-纤维素,属阴离子交换剂带正电荷,结合离子。 分离过程:也是柱层析,原理以阴离子交换层析为例:
离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。 ⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为H+型交换剂。洗涤好的纤维
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