植物线粒体提取试剂盒 蛋白质研究

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名称：植物线粒体提取试剂盒 蛋白质研究
规格：50T/100T
编号：XH053
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
二，说明
植物线粒体提取试剂盒可用于从植物叶片组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于田间采摘或者实验室培养的植物叶片中线粒体的制备。其制备物，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步DNA提取。
三，操作步骤
1. 样本采集前处理：无论田间自然生长还是实验室组织培养，采摘前须避光生长24-48小时，以减少叶片组织中糖类及叶绿体含量。取适量Lysis Buffer，加入0.5% β-巯基乙醇，10ml Lysis Buffer加入50ulβ-巯基乙醇，混匀，形成Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，此溶液可2-8度保存一个月。
2. 叶片用蒸馏水清洗2-3次，滤纸吸干，有条件请用液氮研磨叶片1-2克，研磨完后，取800mg左右研磨的叶片粉，加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，混匀。如果无条件（无液氮），请预冷研钵，取洗过的叶片1000 mg，用剪刀剪为碎块放入玻璃匀浆器或者研钵中。加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，冰上研磨至看不见明显组织块；
3. 将研磨物放置合适的离心管，4℃，1000× g 离心5 min；
4. 将上清转移到一新的离心管中，在沉淀中加入0.5ml Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，混匀，再次4℃，1000× g 离心5 min，取上清；合并两次上清，将上清4℃ 1000× g 再次离心5 min。
5．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 16,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。
6. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000× g 离心5 min；
7．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 16,000 × g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
8. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。
四 注意事项：
1. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
2. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接在第7步的沉淀中加入上样缓冲液裂解线粒体。
3. β-巯基乙醇有毒，请注意通风及防护
五 储存：本试剂盒三个月内使用可4℃储存，长期可置-20℃。

一般低温度心机都有离心力显示，如果没有，可以用以下公式简单的换算。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；
[rpm] ２即：转速的平方； R为半径，单位为厘米。

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·载体两性电解质PH4-9
编号：XH072
规格：12ml
别名：两性电解质两性电解质载体(PH4-9)：Ampholyte solution、Ampholine。
性状；近无色至浅黄色透明液体，有粘性，为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多氨基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度：为40％的溶液
用途：用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存：充氮密封4℃保存。保持期，两年。开启后请尽快用完。

·HRP－羊抗人IgG
编号：XH098
规格：100ul/1ml
根过氧化物酶（HRP）标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。我们生产的辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗人IgG是将辣根过氧化物酶（HRP，来源于SIGMA），经过碘酸钠氧化而标记在抗体羊抗人IgG（来源于我公司自己纯化的抗体）分子上，而制成HRP－羊抗人IgG。
储存条件：-20℃冻存。
浓度：抗体2mg/ml。HRP 1mg/ml
应用范围：HRP－羊抗人IgG主要用于一抗来源于人多抗（单抗也行）的后续实验。如免疫组化，Western blotting，ELISA等实验。

主要性能：
免疫组化：1：20～50，DAB显色
免疫印迹法：1：100～400，DAB显色，1：1000～5000，ECL发光显色
ELISA法：1：500～2000（最高可达一万），用TMB显色


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